一种生物传感器及基因捕获系统的构建方法

摘要

本发明公开了一种生物传感器及基因捕获系统的构建方法，属于生物技术技术领域。该生物传感器是以不动杆菌Acinetobacter baylyiADP1为底盘生物构建的转化体或重组体。该基因捕获系统的构建方法包括基因片段的捕获和对捕获的基因片段进行测序得到捕获的基因片段的序列。该生物传感器及基因捕获系统的构建方法提供了一种以现有的宏基因组学相关技术为基础而开发的基于全细胞的生物传感器及从环境样品中捕获功能基因的技术。

主权项

一种生物传感器的构建方法，其特征在于，所述生物传感器是以不动杆菌Acinetobacter baylyiADP1为底盘生物构建的转化体或重组体，其构建方法包括以下步骤：在不动杆菌Acinetobacterbaylyi ADP1的salA‑salR基因中构建BamHI和EcoRI限制性内切酶酶切位点，通过引物及引物上的BamHI酶识别位点和EcoRI酶识别位点获得不动杆菌Acinetobacter baylyi ADP1的salA‑salR基因的5’部分和3’部分；将salA‑salR基因的5’部分和3’部分连接，获得完整的salA‑salR基因；将所述salA‑salR基因与pGEM‑T载体连接，获得重组表达载体pSalAR_BE，进而获得质粒pSalAR_BE；利用内切酶酶切所述质粒pSalAR_BE，获得线性pSalAR_BE；将经过内切酶酶切的含有报道基因的质粒和所述线性pSalAR_BE连接，获得含有所述报道基因的表达载体；利用所述含有报道基因的表达载体筛选具有所述报道基因特性的单克隆菌株；利用所述单克隆菌株和所述Acinetobacter baylyi ADP1的感受态细胞浓缩液筛选出具有所述报道基因特性的所述生物传感器。