发明名称 一种氧化石墨烯固定化碱性蛋白酶的制备方法
摘要 本发明涉及一种氧化石墨烯固定化碱性蛋白酶的制备方法,包括:(1)以氧化石墨为原料,用磷酸盐缓冲液将其溶解,然后磁力搅拌,超声,静置过夜,得到氧化石墨烯溶液;(2)在上述氧化石墨烯溶液中加入戊二醛,pH值为7.0-8.0,于4-37℃下交联1-12h,离心,之后加入100-1000μl碱性蛋白酶,于4-37℃下吸附0.5-8h,离心,最后经磷酸盐缓冲液冲洗,制得氧化石墨烯固定化碱性蛋白酶。本发明工艺简单,成本低;制得的氧化石墨烯固定化蛋白酶形状均一,表面具备大量活性基团,分散性良好,表面积大;酶活力回收率平均达到70.1%;与溶液酶相比,固定化酶对底物的亲和力提高。
申请公布号 CN102660533A 申请公布日期 2012.09.12
申请号 CN201210134334.9 申请日期 2012.05.02
申请人 东华大学 发明人 李登新;苏瑞景;章文锋;时鹏辉;毕得福;谭东栋;李艳红;郭广麟;朱少波;邵先涛;李洁冰;孙秀枝;朱振新;陈明华;郭苗
分类号 C12N11/14(2006.01)I 主分类号 C12N11/14(2006.01)I
代理机构 上海泰能知识产权代理事务所 31233 代理人 黄志达;谢文凯
主权项 一种氧化石墨烯固定化碱性蛋白酶的制备方法,包括:(1)以氧化石墨为原料,用磷酸盐缓冲液将其溶解,然后磁力搅拌,超声,静置过夜,得到氧化石墨烯溶液;(2)在上述氧化石墨烯溶液中加入戊二醛,pH值为7.0‑8.0,于4‑37℃下交联1‑12h,离心,之后加入100‑1000μl碱性蛋白酶,于4‑37℃下吸附0.5‑8h,离心,最后经磷酸盐缓冲液冲洗,制得氧化石墨烯固定化碱性蛋白酶;其中,戊二醛的加入量为溶液总容量的0.1‑4%。
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