一种同步检测多种烟草病毒的方法

摘要

本发明涉及一种同步检测多种烟草病毒的方法，该方法包括提取烟草病毒总RNA，反转录得cDNA模板，应用引物组对模板进行多重PCR，然后检测产物，确定病毒种类，其中烟草病毒选自烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、马铃薯Y病毒(PVY)、烟草蚀纹病毒(TEV)和烟草脉带花叶病毒(TVBMV)中的2-5种，其中引物组包含5对序列SEQ ID NO.1-10中的2-5对，该方法极大地提高了多种烟草病毒同步检测的效率，降低检测成本。

主权项

一种同步检测2‑5种烟草病毒的方法，该方法包括烟草病毒总RNA的提取，多重RT‑PCR和电泳检测确定病毒种类，其中烟草病毒选自烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、马铃薯Y病毒(PVY)、烟草蚀纹病毒(TEV)和烟草脉带花叶病毒(TVBMV)中的2‑5种，其中多重RT‑PCR反应中应用的引物为包含如下5对引物的引物组：第1对引物：SEQ ID NO.1：5′‑TAGACCCGCTAGTCACAG‑3′SEQ ID NO.2：5′‑CAGAGGTCCAAACCAAAC‑3′第2对引物：SEQ ID NO.3：5′‑GTGGGTGACAGTTCGTAAA‑3′SEQ ID NO.4：5′‑GTGGGAATGCGTTGGT‑3′第3对引物：SEQ ID NO.5：5′‑TGATGGATGGTGAGGAG‑3′SEQ ID NO.6：5′‑GTGCCGTTCAGTGTCTT‑3′第4对引物：SEQ ID NO.7：5′‑CCGAGAATCAAGGCTATC‑3′SEQ ID NO.8：5′‑CGCTAAACCTACATCCC‑3′第5对引物：SEQ ID NO.9：5′‑GAGGTCGTGAACTTACAGC‑3′SEQ ID NO.10：5′‑GAGGTCGTGAACTTACAGC‑3′。