一种载TGF-β3的缓释组织工程膜的制备方法

摘要

本发明公开了一种载TGF-β3的缓释组织工程膜的制备方法，包括（1）壳聚糖不对称膜的制备；（2）壳聚糖微球的制备；（3）载TGF-β3的壳聚糖缓释膜制备。本发明载TGF-β3的缓释组织工程膜，能够达到很好的缓释效果，持续释放TGF-β3，具有持续很好的抗粘连作用，同时由于是膜状应用范围很广也很灵活，用于骨科中抗粘连的治疗效果非常好。

主权项

一种载TGF‑β3的缓释组织工程膜的制备方法，其特征在于：按如下步骤进行：（1）壳聚糖不对称膜的制备a、致密层的形成壳聚糖溶于1％的醋酸水溶液，配制成2％的壳聚糖溶液，4℃离心5min，去除杂质，静置除气泡后待用；将1.0ml上述溶液浇入直径9cm培养皿中，室温放置24h自然晾干形成致密层；b、多孔层的形成再将3m1的壳聚糖溶液倾入放置致密层的培养皿中，‑20℃预冻1h后冷冻干燥形成多孔层得到壳聚糖不对称膜；（2）壳聚糖微球的制备壳聚糖120mg溶于2％的醋酸水溶液4‑6ml，配成2％的壳聚糖溶液，静置除气泡后待用；150ml烧杯中加入80mI液体石蜡，调整搅拌速度至1000rpm，滴加乳化剂Span‑80 4ml；用无菌注射器将壳聚糖溶液逐滴加至液体石蜡中，搅拌乳化至颜色呈均一稳定乳白色；加入0.4ml的50％戊二醛溶液与壳聚糖交联固化，搅拌固化1小时，静置固化20分钟，淡黄色微球沉淀于杯底；倾去上层油相，大量石油醚反复清洗，倒去上层石油醚，得微球，石油醚室温挥发30分钟，得较干燥微球；（3）载TGF‑β3的壳聚糖缓释膜制备：将步骤（1）壳聚糖不对称膜裁成直径为1cm的圆片，准确称量TGF‑β3， 按壳聚糖微球0.5mg含TGF‑β3 10mg悬于100ul的90％酒精，加入壳聚糖膜多孔层，使微球均匀吸附到壳聚糖膜的孔隙中得到载TGF‑β3的壳聚糖缓释膜。