一种地西泮胶体金法检测试纸及制备方法

摘要

一种地西泮胶体金法检测试纸及制备方法，属于生物学免疫方法的测定技术领域。本发明检测试纸由样品垫、结合释放垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和塑料底板组成，塑料底板上依次粘贴样品垫、结合释放垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，结合释放垫上包被了抗地西泮多抗-胶体金标记物，硝酸纤维素膜上依次包被有地西泮偶联抗原和羊抗兔IgG抗体，以地西泮偶联抗原作为测试线，以羊抗兔IgG抗体作为质控线。本发明具有使用方便、经济快捷、制作容易、成本低廉的特点。

主权项

一种地西泮胶体金法检测试纸的制备方法，所述地西泮胶体金法检测试纸由样品垫、结合释放垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和塑料底板组成，塑料底板上依次粘贴样品垫、结合释放垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，结合释放垫上包被了抗地西泮多抗‑胶体金标记物，硝酸纤维素膜上依次包被有地西泮偶联抗原和羊抗兔IgG抗体，以地西泮偶联抗原作为测试线，以羊抗兔IgG抗体作为质控线；其特征在于，其制备步骤为：(1)将地西泮与牛血清蛋白分子进行偶联，作为地西泮偶联抗原；(2)用地西泮偶联抗原按常规方法免疫制得抗地西泮多抗；(3)用柠檬酸三钠还原剂将氯金酸还原制成20nm‑40nm胶体金颗粒；(4)将3mL胶体金调至pH9，搅拌下逐滴加入蛋白浓度为0.2mg/mL的抗地西泮多抗0.05mL，放置30min后加入5％牛血清蛋白BSA溶液使终浓度为1％，放置至少30min后，10000转离心50min，移去上清液后用含5％蔗糖的0.002mol/LpH9.0的硼酸盐缓冲液3mL重悬，重复2次，最后用0.3mL缓冲液溶解，得到稳定的抗地西泮多抗‑胶体金标记物；(5)将抗地西泮多抗‑胶体金标记物包被在胶体金结合释放垫上，将地西泮偶联抗原和羊抗兔IgG抗体分别包被在硝酸纤维素膜上，地西泮偶联抗原作为测试线和羊抗兔IgG抗体作为质控线，在37℃烘箱干燥；(6)试纸条的组装：将样品垫、结合释放垫、硝酸纤维素膜、吸水垫由一端依次黏附在塑料底板上，即得到用于免疫检测的地西泮胶体金法检测试纸。