脂质酰基转移酶蛋白及其制备方法

摘要

本发明一方面提供了制备脂质酰基转移酶变体的方法，所述方法包括在宿主生物中表达与编码亲本脂质酰基转移酶的核苷酸序列具有至少90%同一性并且包含至少一个修饰(合适地为至少两个修饰)的核苷酸序列，所述修饰的位置对应于在所编码的氨基酸序列中位于以下的氨基酸：a)所述酶的峡谷区(即优选氨基酸残基31、27、85、86、119和120)；和/或b)插入位点1(即氨基酸残基22-36)和/或c)插入位点2(即氨基酸残基74-88)，其中所述峡谷区、插入位点1和/或插入位点2被定义为在基于初级或三级结构比对时，对应于本发明SEQ ID No.16或6所示的酶的峡谷区、插入位点1或插入位点2(或以上教导的相应氨基酸残基)的区域。优选的修饰为以下一个或多个：L3IQ,H,N,T,F,Y或C(优选L31Q)；M27R,G，H,K,Y，D,N,V，C,Q,L,E,S或F(优选M27V)；V85H,R5D或E；I86R,Y，S,V，I,As,T,M,F,C或L(优选I86S或A)；A119T或I；Y120K或E；W122S,L或A(优选W122L)；E201R；Q245S；F235A或V；W232G或S；和/或A236G或E。

主权项

制备变体脂质酰基转移酶的方法，所述方法包括在宿主生物中表达与编码亲本脂质酰基转移酶的核苷酸序列具有至少90%同一性且包含至少一个修饰的核苷酸序列，所述修饰的位置对应于在所编码的氨基酸序列中位于第27、31、85、86、122、119、120、122、201、235、232、236、245、232、235和/或236位的氨基酸，其中所述位置编号定义为当基于初级或三级结构比对时，对应于本文SEQ ID No.6所示的酶相同位置的位置。