一种用于冠心病检测和治疗的纳米磁性粒子的制备方法

摘要

一种用于冠心病检测和治疗的纳米磁性粒子的制备方法，包括以下步骤：A、在磁核表面固定过渡层分子，所述的过渡层分子为同时含有氨基、羧基或巯基及能与羟基进行反应的基团的化合物；B、然后在固定了过渡层分子的磁核上固定具有延长纳米粒子在血液中停留时间的功能性分子；C、再在固定了功能性分子的磁核上固定内皮祖细胞或病变内皮细胞的特异性识别配体，即得。该方法既能制出用于冠心病前期病变内皮细胞的检测和定位的磁性纳米粒子，其检测灵敏、可靠；也能制出用于冠心病中后期治疗磁性纳米粒子；对冠心病的修复，治疗效果好。

主权项

一种用于冠心病检测和治疗的纳米磁性粒子的制备方法，包括以下步骤：A、在磁核表面固定过渡层分子，所述的过渡层分子为同时含有氨基、羧基或巯基及能与羟基进行反应的基团的化合物；B、然后在固定了过渡层分子的磁核上固定具有延长纳米粒子在血液中停留时间的功能性分子；C、再在固定了功能性分子的磁核上固定内皮祖细胞或病变内皮细胞的特异性识别配体，即得；所述的磁核为粒径在5‑50nm之间，具有顺磁性或超顺磁性，且成分为γ‑Fe2O3、Fe3O4、MnFe2O4或Mn3O4的粒子；所述的过渡层分子为多巴胺、含有氨基、羧基或巯基的硅烷偶联剂、柠檬酸、3‑巯基丙酸、巯基丁二酸、巯基乙酸、半胱氨酸、巯基丁酸、巯基戊酸、巯基己酸、二巯基丁二酸、谷氨酸或赖氨酸；所述的功能性分子为：HCOO‑PEG‑COOH、NH2‑PEG‑NH2、NH2‑PEG‑COOH、OH‑PEG‑COOH或HOOC‑PEG‑CHO中的一种聚乙二醇衍生物；或者为高碘酸氧化肝素、高碘酸氧化壳聚糖、高碘酸氧化磺化壳聚糖中的一种；所述的功能性分子为疏水多肽，其序列为AAAAAFFFFFAAAAA或Ac‑AAAAAARRAAAAAA‑CONH2或Ac‑AAAAAARRGGGGGG‑CONH2；所述的内皮祖细胞的特异性识别配体为：与内皮祖细胞特异性识别的抗体：CDw90、CD117、HLA‑DR、Sca‑1、CD130、CD146、Tie‑2、HAD‑DR；或者与内皮祖细胞特异性识别的多肽序列：THR PRO SER LEU GLUGLN ARG THR VAL TYR ALA LYS、SER TYR GLN THR LEU LYS GLN HISLEY PRO TYR GLY或SER TRP ASP ISO LEU LYS PRO ASN PRO GLN RPOLEU；或者与内皮祖细胞特异性识别的核酸序列：tcg tcg ttt tgt cgt ttt gtc gt、ccgccg ccg ccg ccg ccg ccg、gcg gcg gcg cgc gcg gcg gcg、cgg cgg cgg cgg cgg cggcgg、ttc ttc ttc ttc ttc ttc ttc、tta ggt tag gtt agg tta ggt tag g、gct aga cgt tag cgt、 gct aga gct tag gct、gat tgc ctg acg tca gag ag、ttc atg acg ttc ctg atc gt、tcc atg act ttcctc agg tt、tcc atg agc ttc ctg atg ct、tgc cgc ttt tgt gct ttt gtg ctt、ccg cgg cca ggc tagcta caa cga cct gga cga t、att gtg gtt ggt agt ata cat ttt tcc gcg gcc agg cta gct aca acgacc tgg acg at、ctt taa tgc ggg gta att tct ttt cca taa tcg c、tta ttt ccc ttc tgt ata tag atatgc taa atc ctt act t；所述的病变内皮细胞的特异性识别配体为多肽序列：VHPKQHRGGSKGC或CVHSPNKKC；所述A步中磁核表面固定过渡层分子的具体作法是：将磁核均匀分散在过渡层分子水溶液体系中，磁核与过渡层分子的质量比为1∶0.05～150，固定时间0.5h～36h，磁分离并去离子水清洗；所述B步在固定了过渡层分子的磁核上固定功能性分子的具体做法是：去离子水中加入1‑乙基‑3‑(3‑二甲基氨丙基)‑碳化二亚胺(EDC)和N‑羟基琥珀酰亚胺(NHS)形成催化体系，再在催化体系中加入固定了过渡层分子的磁核和功能性分子进行催化偶联反应，最后磁分离并去离子水清洗；各物质质量比为固定了过渡层分子的磁核∶功能性分子∶1‑乙基‑3‑(3‑二甲基氨丙基)‑碳化二亚胺∶N‑羟基琥珀酰亚胺＝1∶1～100∶0.05～1∶0.05～1；所述C步在固定了功能性分子的磁核上固定特异性识别配体的具体做法是：去离子水中加入1‑乙基‑3‑(3‑二甲基氨丙基)‑碳化二亚胺(EDC)/N‑羟基琥珀酰亚胺(NHS)形成催化体系，再在催化体系中加入固定了功能性分子的磁核和特异性识别配体进行催化偶联反应，最后磁分离并去离子水清洗；各物质质量比为固定功能性分子的磁核∶特异性识别配体∶1‑乙基‑3‑(3‑二甲基氨丙基)‑碳化二亚胺∶NHS＝1∶1～100∶0.05～1∶0.05～1。