多重PCR检测金黄色葡萄球菌及其肠毒素基因型的方法

摘要

一种运用多重PCR技术检测金黄色葡萄球菌及其肠毒素基因型的方法，主要的技术方案是设计引物序列并对多重PCR反应体系及反应条件进行优化。金黄色葡萄球菌的肠毒素和侵袭性酶影响了金葡菌致病力强弱，现已鉴定出的肠毒素有A、B、C1-C3、D、E、G、H、I、J、L、M、N共14种。一般说来，食物中毒时A、D型常见，B、C型次之，涉及到E毒素的发生率最低，各肠毒素毒力不一，其中A型毒素毒力较强，D型较弱。针对金葡菌常见肠毒素基因型，本发明克服了现有技术中的缺点，提供了一种运用多重PCR技术检测食品中金黄色葡萄球菌及其肠毒素基因型的方法。该方法可在同一反应体系中，同时检测出产A、B、C、D型肠毒素的金黄色葡萄球菌。

主权项

1.一种多重PCR检测金黄色葡萄球菌及其肠毒素基因型的方法，包括：应用该方法检测食源性病原微生物所使用的引物组和与之配套的PCR反应条件，其特征在于：所使用的引物组序列如下：引物：；多重PCR扩增程序及测定扩增片段的溶解温度程序如下：（1）预变性：94℃，5min；（2）变性：94℃，45s；（3）退火：57.8℃，35s；（4）延伸：72℃，45s；（5）回到（2）共30个循环；（6）72℃延伸7min。