发明名称 一种用凝集素芯片同时分析甲型流感病毒亚型及其毒力的方法
摘要 一种用凝集素芯片同时分析甲型流感病毒亚型及其毒力的方法,首先制备凝集素芯片和制备生物样本;然后将生物样本加载到凝集素芯片上来检测甲型流感病毒中的糖蛋白糖链,来快速判定甲型流感病毒的亚型以及其致病性强弱。解决常规检测流感病毒方法不能快速同时检测甲型流感病毒亚型及其毒力的技术问题。具有快速、简便、效率高等优点。
申请公布号 CN102192848B 申请公布日期 2012.09.05
申请号 CN201010118954.4 申请日期 2010.03.05
申请人 西北大学 发明人 李铮;杜亚蓉;孙宇;祁会彩;邓炜娜;王秀荣
分类号 G01N1/28(2006.01)I;G01N1/40(2006.01)I;G01N1/42(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I 主分类号 G01N1/28(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种用凝集素芯片同时分析甲型流感病毒亚型及其毒力的方法,该方法包括以下步骤:1)制备凝集素芯片;2)制备生物样本;3)将生物样本加载到凝集素芯片上以获得甲型流感病毒亚型及其毒力的结果,具体包括以下步骤:3.1)将质量分数为1‑2%牛血清白蛋白溶解到磷酸盐缓冲液‑吐温20中配制成封闭液,将制备好的凝集素芯片置于封闭液中1小时;3.2)将封闭后的凝集素芯片用磷酸盐缓冲液‑吐温20和磷酸盐缓冲液分别清洗各2次,每次3分钟,再经甩干后备用;3.3)对甩干后的凝集素芯片加入3‑5μg标记好的样本和750‑850μL的孵育缓冲液,并在室温孵育3小时;3.4)将孵育后的凝集素芯片用磷酸盐缓冲液‑吐温20和磷酸盐缓冲液分别清洗各2次,每次3分钟,再甩干;3.5)对甩干后的凝集素芯片用芯片扫描仪扫描,得到凝集素与标记后糖蛋白结合的荧光图像;3.6)通过芯片分析软件对荧光图像进行中值读取,对图像中的凝集素所对应的糖链结构分析后得出甲型流感病毒亚型及其毒力的结果。
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