一种基于¹⁸O标记的N-糖链相对定量方法

摘要

本发明属分析化学技术领域，具体为一种基于18O标记的N-糖链相对定量方法。具体是将糖苷内切酶催化生成的同位素18O标记的N-糖链与糖苷内切酶催化生成的不标记的N-糖链按等摩尔比混合为溶液，由生物质谱检测峰强度，再经计算消除同位素峰重叠后，进行相对定量。本发明成功解决了同位素18O标记的糖链与不标记的糖链在质谱中同位素峰重叠的问题。本发明在两个数量级的动态范围内，取得了良好的线性和较低的变异系数，为糖苷内切酶催化同位素标记N-糖链的方法在定量糖组学中的应用提供了有效的修正和计算方法。

主权项

一种基于18O标记的N‑糖链相对定量方法，其特征在于，将糖苷内切酶催化生成的同位素18O标记的N‑糖链与糖苷内切酶催化生成的不标记的N‑糖链按等摩尔比混合为溶液，由生物质谱检测峰强度，再经计算消除同位素峰重叠后，进行相对定量；其中溶液体系为50％乙腈0.1％三氟乙酸的水溶液；其中，由生物质谱检测到的峰强度，按下列公式计算消除同位素峰重叠： ratio ( O 16 O 18 ) = I A - I b - 2 I b I B I B - I a + 2 I a I A 其中ratio(16O/18O)表示消除同位素峰重叠后得到的定量结果，即不标记的糖链与同位素18O标记的糖链的比例，IA表示不标记的糖链峰强度，IB表示同位素18O标记的糖链峰强度，Ia+2/Ia表示不标记的糖链中分子量加2道尔顿的同位素峰强度所占比例，Ib‑2/Ib表示同位素18O标记的糖链中分子量减2道尔顿的同位素峰强度所占比例。