一种生物碱类化合物的制备方法

摘要

本发明属于医药技术领域，公开了一种生物碱类化合物及其制备方法。该化合物是从我国广西省太化县都阳山坡的土壤中筛选得到的链霉菌Y05A-1070(CGMCC No.2362)经菌种培养、发酵、发酵液的过滤、萃取、吸附洗脱、冷冻干燥等步骤得到，纯度达到95％以上。该化合物及其药学上可接受的盐是硫酸盐、盐酸盐及有机酸盐能显著抑制A549细胞、HGC-2细胞、HGC-27细胞，MCF-7细胞，提示其具有抗肿瘤的活性，可用于开发抗肿瘤类药物。

23622008.01.25

主权项

1.一种生物碱类化合物A的制备方法，所述的化合物A结构式如下，其特征在于：该方法包括培养能够产生所述化合物A的假浅灰链霉菌(Streptomyces pseudogriseolus)Y05A-1070CGMCC No.2362的培养条件，以及从发酵液中回收所得到的化合物A，其具体步骤如下：(1)假浅灰链霉菌Y05A-1070CGMCC No.2362的斜面培养方法：1L斜面培养基组成：可溶性淀粉20g，NaCl 0.5g，KNO₃ 1g，K₂HPO₄0.5g，FeSO₄ 0.01g，MgSO₄.7H₂0 0.5g，琼脂粉20g，pH7.0，28-30℃，培养7天；(2)假浅灰链霉菌Y05A-1070 CGMCC No.2362的种子液培养方法：1L种子培养基组成：黄豆粉5～15g，酵母膏3～7g，葡萄糖10～30g，淀粉10～30g，K₂HPO₄ 0.1-1.0g，(NH₄)₂SO₄ 0.1-3.0g，MgSO₄.7 H₂O 0.1-0.5g，CaCO₃ 0.1-5.0g，pH7.2，三角摇瓶装量20-60％，转速100-250转/分钟，28-32℃，培养20-48小时；(3)假浅灰链霉菌Y05A-1070 CGMCC No.2362的发酵方法：1L发酵培养基组成：花生粉10-25g，酵母膏5-30g，葡萄糖0.5-30g，蛋白胨0.1-10g，(NH₄)₂SO₄ 0.1-10g，KCl 0.1-3g，pH7.0，发酵罐装量20-60％，接种量3-12％，转速100-250转/分钟，28-32℃，培养5-7天，发酵结束后，发酵产物经过板框压滤机过滤后，得到菌丝体和发酵滤液两部分；(4)步骤(3)得到的菌丝体部分，(a)用清水洗2-3遍后，挤掉大部分水分，常温下晾干；(b)菌丝体用甲醇提取数次，提取物减压浓缩得到浸膏；(c)浸膏用蒸馏水分散，用乙酸乙酯提取数次，经100-200目硅胶柱，以氯仿一乙酸乙酯为流动相梯度洗脱，分离和重结晶纯化，得到化合物A