一种基于表面等离子共振技术的食品中有害物质多残留同时检测方法

摘要

一种基于表面等离子共振（SPR）技术的食品中有害物质多残留同时检测方法，包括传感表面适配体固定、样品标记、样品检测、传感元件再生四个步骤。采用多探头光纤传感器表面连接不同残留组分相应的核酸适配体，加入不同残留组分相应的分子探针标记物并通入传感表面，未标记和标记的残留组分特异性竞争识别相应的核酸适配体。再通入分子探针适配体溶液，与连接在光纤传感器表面的标记样品结合，利用带有多探头光线传感器进行SPR检测。多探头光纤传感器可进行再生，实现传感元件的反复使用。本发明基于SPR技术、适配体特异性竞争识别，实现了同一样品中的多种有害物质残留组分的同时检测，特别是适用于小分子量物质的检测。

主权项

一种应用表面等离子共振仪的食品中有害物质多残留同时检测方法，对同一样品中的多种有害物质残留组分的含量进行同时检测，其特征在于包括下述步骤：（一）传感器表面适配体固定：选择链霉亲和素SA修饰的多探头光纤传感器，每个探头表面连接一种适配体，通过通入5‑50μL浓度为1‑50μg/L已标记生物素的残留组分对应核酸适配体，在多探头光纤传感器上固定上不同残留组分相应的核酸适配体；（二）对待测残留组分进行分子探针标记，标记方法根据待测物基团不同，选择EDC/NHS法交联羧基与氨基或戊二醛法交联两个氨基；（三）标准溶液配制：用0.01‑0.1mol/L（pH＝7.4）的磷酸盐缓冲液配置残留组分的标准样品储备液，储备液浓度为0.1ng/mL至1mg/mL，分别等量量取残留组分的标准储备液，配制含有有害物质残留组分的混合标准原液，用磷酸盐缓冲液将混合标准原液配制成不同浓度的标准溶液，取不同浓度未标记待测残留组分的标准溶液和分子探针标记的待测残留组分充分混合；（四）建立标准曲线：采用表面等离子共振谱仪测量，以0.02mol/L的磷酸盐缓冲液为测量基准，通过微泵通入5‑100μL待测混合样品，随后通入5‑100μL浓度为5‑100ng/mL的分子探针的适配体溶液，记录下表面等离子体共振仪光谱图；取不同浓度待测样品的表面等离子体共振谱图稳定值，绘制工作曲线，并进行多项式曲线拟合，获得回归曲线的方程；依次测得多种有害物质残留组分的工作曲线，进行多项式曲线拟合，获得各自的标准曲线；（五）定量检测：对于未知含量的多种残留组分样品进行检测，同样按照步骤（三）进行；再通入适量分子探针适配体溶液，采用表面等离子共振谱仪记录多种有害物质残留的光谱图；将光谱图中不同残留组分的稳定值代入相应的回归曲线方程，计算出不同食品中残留组分的浓度值；（六）通入0.01‑0.05mol/L（pH为2‑3）的甘氨酸‑盐酸缓冲溶液，冲洗多探头光纤传感器表面，进行传感元件再生，用于下次测量。