一种农杆菌介导的四倍体硬粒小麦Stewart的遗传转化方法

摘要

本发明公开了一种农杆菌介导的四倍体硬粒小麦Stewart的遗传转化方法。该方法包括如下步骤：用目的农杆菌侵染四倍体硬粒小麦的幼胚，再进行共培养，将目的基因导入小麦幼胚；所述目的农杆菌为将目的基因导入根癌农杆菌菌株AGL1得到的。本发明建立四倍体硬粒小麦Stewart的幼胚农杆菌转化体系，转化效率高，可达2.3-12.26％，平均效率6.32％，重复性好。本发明方法对提高小麦及其近缘属农杆菌转化效率，利用四倍体突变体库研究小麦的功能基因组学及我国小麦品种的遗传改良和创制转基因小麦新种质等具有十分重要的意义。

主权项

一种转化四倍体硬粒小麦Stewart的方法，包括如下步骤：用目的农杆菌侵染四倍体硬粒小麦Stewart的幼胚，再进行共培养，将目的基因导入小麦Stewart的幼胚；所述目的农杆菌为将目的基因导入根癌农杆菌菌株AGL1得到的；所述幼胚为授粉12‑14天后的心型胚；所述侵染包括如下步骤：将所述幼胚盾片朝上放置于接种培养基上，再向其中倒入所述目的农杆菌菌液，在黑暗条件下浸泡0.5‑3小时；所述接种培养基中含有乙酰丁香酮，乙酰丁香酮在接种培养基中的浓度为400μM；所述共培养的方法包括如下步骤：将所述侵染后的幼胚置于共培养培养基中，在22‑25℃的温度下暗培养1‑3天；所述共培养培养基中包括终浓度为10mg/L的氨氯吡啶酸和400μM的乙酰丁香酮。