一种固定化谷氨酸脱羧酶及其制备方法

摘要

本发明公开了一种固定化谷氨酸脱羧酶及其制备方法。该固定化谷氨酸脱羧酶是按照包括下述步骤的方法制备得到的：1)向乳酸菌中加入醋酸-醋酸盐缓冲液，配制成每毫升含菌数为300-500cfu的菌悬液，将所述菌悬液在冰水浴条件下超声破碎，得到谷氨酸脱羧酶的粗酶液；2)使用棉绒布为载体，依次用氢氧化钠、吡啶、对甲苯磺酰氯进行预处理；3)将预处理的棉绒布置于谷氨酸脱羧酶粗酶液中浸泡，然后向溶液中加入戊二醛，实现谷氨酸脱羧酶的固定化。本发明提供的谷氨酸脱羧酶的固定化方法简单，条件要求温和，易于实现，所得到的固定化谷氨酸脱羧酶具有活力高、负载量大、催化反应寿命长等优点。

主权项

一种谷氨酸脱羧酶的固定化方法，包括下述步骤：1)制备谷氨酸脱羧酶粗酶液：向乳酸菌中加入醋酸‑醋酸盐缓冲液，配制成每毫升含菌数为300‑500cfu的菌悬液，将所述菌悬液在冰水浴条件下超声破碎，得到谷氨酸脱羧酶的粗酶液；其中，所述醋酸‑醋酸盐缓冲液的浓度为0.1‑0.4mol/L，pH值为4.0‑5.0；2)预处理棉绒布载体：依次用氢氧化钠、吡啶、对甲苯磺酰氯对棉绒布进行预处理，得到预处理的棉绒布载体；3)将预处理的棉绒布载体置于步骤1)得到的谷氨酸脱羧酶粗酶液中浸泡30‑50min；4)向步骤3)的体系中加入戊二醛，使其终浓度达到0.2‑1mol/L，继续浸泡1‑2h，即得到固定化谷氨酸脱羧酶。