一种基于属特异性引物-PCR结合链霉素抗性平板特异性分离鞘氨醇单胞菌的方法及其专用引物

摘要

本发明涉及微生物学技术和分子生物学技术交叉领域，具体的说一种基于属特异性引物-PCR结合链霉素抗性平板特异性分离鞘氨醇单胞菌的方法及其专用引物。具体为，将待测样品悬液涂布含链霉素的LB培养基固体平板，挑取黄色菌落反复划线分纯，经液体培养后，提取纯菌株基因组DNA，采用鞘氨醇单胞菌属特异性引物PCR扩增16SrDNA片段，存在阳性扩增且扩增得到504bpPCR产物的片段即为鞘氨醇单胞菌。采用本发明提供的属特异性引物扩增结合链霉素抗性平板法能够特异性的从土壤中直接分离可培养的鞘氨醇单胞菌，针对这一特殊种属进行计数，同时获得可培养的鞘氨醇单胞菌菌株资源。

主权项

一种基于属特异性引物‑PCR结合链霉素抗性平板特异性分离鞘氨醇单胞菌的专用引物，其特征在于：鞘氨醇单胞菌属特异性引物Sph‑429f和Sph‑933r为Sph‑429f：5’‑TAAAGCTCTTTTACCCG‑3’；Sph‑933r：5’‑AAACCACATGCTCCACC‑3’。