发明名称 一种植物超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶活力检测方法
摘要 本发明公开了一种植物超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶活力检测方法,包括样品的液氮研磨、采用一种缓冲液同时提取三种酶、以及酶活力测定等步骤。该方法采用一种缓冲液即可同时提取植物中的SOD、CAT和POD三种酶,可达到简单、快速检测植物中的SOD、CAT和POD酶活力的目的,简化操作,省时省力,减少样品和试剂用量等,有利于实现批量操作,并且检测结果与传统方法无明显差异;此外,本发明方法在酶液提取之前采用液氮研磨法对样品进行研磨,研磨速度快,细胞破碎效果好,提取效率高。
申请公布号 CN101870998B 申请公布日期 2012.08.22
申请号 CN201010224740.5 申请日期 2010.07.13
申请人 四川农业大学 发明人 吴卫;徐应文;刘正琼;邵金凤;赵丹;杨文婷
分类号 C12Q1/30(2006.01)I;C12Q1/28(2006.01)I 主分类号 C12Q1/30(2006.01)I
代理机构 成都九鼎天元知识产权代理有限公司 51214 代理人 刘明芳;吴彦峰
主权项 一种植物超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶活力检测方法,包括下述主要步骤:(1)、样品研磨:取新鲜或超低温保存的植物叶片或其它组织,采用液氮研磨法进行研磨;(2)、酶液提取:将上述步骤(1)研磨后的样品加入0~4 ℃预冷的浓度为0.1~0.3 mol/L、pH 6.5~7.5的磷酸缓冲液进行浸提30min~12h,0~4 ℃下离心处理,取上清液,即得同时含有SOD、CAT和POD的混合酶液,0~4 ℃保存备用;(3)、酶活力测定:分别采用传统的测定方法对SOD、CAT和POD酶活力进行测定。
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