发明名称 |
细胞培养法生产人参皂甙及多糖的方法 |
摘要 |
细胞培养法生产人参皂甙及多糖的方法,是一种利用多年生人参的根细胞培养,利用酶技术缩短细胞培养周期,来生产人参皂甙及多糖的方法。本发明采用细胞培养法来培养和生产人参植物细胞,进而提取人参皂甙和多糖,种子细胞收集时加入纤维素酶,能提高种子细胞收集率5%-10%,种子细胞培养中,加入生长素、果胶酶能诱使组织细胞加快生长繁殖,缩短培养周期,约能够减少1/4—1/6时间,有效降低了培养过程的感染率,提高产品收率。本发明工艺简单、稳定,并利用了酶技术缩短了细胞培养周期,提高收率,适合工业化生产。 |
申请公布号 |
CN102634477A |
申请公布日期 |
2012.08.15 |
申请号 |
CN201210127745.5 |
申请日期 |
2012.04.27 |
申请人 |
江西中天医药生物有限公司 |
发明人 |
高国文;李成林 |
分类号 |
C12N5/04(2006.01)I;C07J17/00(2006.01)I;C08B37/00(2006.01)I |
主分类号 |
C12N5/04(2006.01)I |
代理机构 |
南昌新天下专利商标代理有限公司 36115 |
代理人 |
谢德珍 |
主权项 |
细胞培养法生产人参皂甙及多糖的方法,其特征在于,是一种利用多年生人参的根细胞培养,利用酶技术缩短细胞培养周期,来生产人参皂甙及多糖的方法,具体流程为:(1)种子细胞采集:①取新鲜的多年生人参的根清洗消毒,将洗净的人参块根用10‑20%次氯酸钠溶液浸泡10‑30分钟,用无菌水清洗块根至次氯酸钠无残留;②将清洁后的块根放入打浆机加入MS培养基,每1.5g加入10ml,打浆;③将打浆液加入纤维素酶100mg/kg,放置3‑5小时,用50‑80微米孔径的微孔滤器过滤,滤液用低速离心机分离,去杂质及上清液收集种子细胞;(2)种子细胞培养:①将收集到的种子细胞接种到含改良MS培养基的种子罐中,接种量为10‑20g/L,调pH 5‑6,温度20‑25℃;②摇床或震荡种子罐培养20‑30小时,计算细胞数量20000‑40000个/ml,即可扩大培养;(3)细胞扩大培养:①将培养好的种子细胞接种于有机械搅拌的生物反应器内,悬浮培养,培养基用改良的MS培养基,接种量为15‑25g/L,搅拌速率90‑120r/min,pH 5‑6,通入过滤空气,速率0.01‑0.05m³/s;②加入生长素2,4‑D 0.5‑1mg/L,果胶酶50‑80mg/L,暗培养20‑25天,细胞计数35000‑50000/ml即停止培养;(4)采用离心或其他方法收集人参植物细胞,即可用常规方法提取人参皂甙及多糖。 |
地址 |
330000 江西省南昌市郊鲤鱼洲(五星垦殖场) |