一种用发光细菌对抗生素类物质毒性进行检测的方法

摘要

本发明提供一种用发光细菌对抗生素类物质毒性进行检测的方法：抗生素类物质与发光细菌作用时间延长至12-36个小时，优选延长至24个小时。本发明技术方案中增加抗生素类物质与发光细菌的作用时间，保证发光细菌在此期间发生增殖，该方法可以实现对抗生素生物毒性的准确表征具有较好的时效性，在保证时效性的基础上使检测结果更加准确，实现了抗生素类污染物延迟毒性的检测。

主权项

一种用发光细菌对抗生素类物质毒性进行检测的方法，包括如下步骤；1)配制抗生素母液并将母液稀释至实验所需浓度；2)制备发光细菌冻干粉复苏液；3)空白对照制备：对于溶解性的抗生素，将发光细菌复苏液作为空白对照；对于不溶或微溶性的抗生素，将含有与对应待测样品具有相同含量二甲基亚砜的复苏液作为空白对照；4)待测样品溶液制备：取不同浓度的待测样品加入到干净的测试管中，摇匀；5)将空白对照和待测样品相间放置于测试架上；6)按顺序向各个测试管中加入复苏的发光细菌冻干粉(根据发光量和仪器要求调节加入量)，两管加入时间相隔15‑30s，轻轻振荡，使之均匀，7)EC50值的计算：以待测样品浓度的对数为横坐标，对应的相对发光率为纵坐标作图，求得其EC50值，即相对发光率在50％的样品的浓度；其特征在于，所述步骤6)的放置后，向各个管中按比例依次加入发光细菌的完全培养基，使抗生素类物质与发光细菌作用时间延长至12‑36h后在水质毒性检测仪测定发光量。