用化学修饰的引物相比于DNA优先扩增mRNA

摘要

本发明涉及用包含至少一个在环外氨基处被修饰的核苷酸的寡核苷酸而对包含外显子-外显子接头的信使RNA目标进行选择性扩增的方法、寡核苷酸、反应混合物和试剂盒。

主权项

一种选择性扩增信使RNA目标的方法，包括步骤：a. 将第一寡核苷酸与所述mRNA目标杂交，用至少一种能够RNA‑引导合成的酶进行RNA‑引导的DNA合成，其中所述第一寡核苷酸：     i. 包含至少一个具有在环外氨基处被共价修饰的碱基的核苷酸，     ii. 与所述mRNA目标至少部分互补，和     iii. 在目标中横跨外显子‑外显子接头；b. 用所述第一寡核苷酸和第二寡核苷酸以及至少一种能够DNA‑引导的DNA合成的酶扩增步骤 a）的产物；其中所述第二寡核苷酸与所述mRNA目标至少部分互补。