一种定型内胚层细胞的制备和分离方法

摘要

本发明公开了一种定型内胚层细胞(DE)的制备和分离方法；本发明还公开了用于促进定型内胚层细胞向分化的分化培养基，所述分化培养基含有活化素A和Wnt信号通路激动剂；本发明还公开了可用于分选内胚层细胞的表面标记。

主权项

一种制备含定型内胚层细胞的细胞群的方法，其特征在于，所述方法包括：(1)培养胚胎干细胞，形成拟胚体；和(2)用含活化素A、Wnt信号通路激动剂和BMP4信号通路抑制剂的分化培养基处理拟胚体，诱导拟胚体分化，从而获得含有定型内胚层细胞的细胞群，所述细胞群中定型内胚层细胞占60％以上；所述的Wnt信号通路激动剂选自：(2’Z，3’E)‑6‑Bromoindirubin‑3′‑肟或LiCl；并且，LiCl的用量是0.5‑10mM或(2’Z，3’E)‑6‑Bromoindirubin‑3′‑肟的用量是0.5‑5μM；所述BMP4信号通路抑制剂是Noggin。