人精子特异性转移因子口服制剂及其制备工艺

摘要

一种人精子特异性转移因子口服制剂及其制备工艺，该工艺主要包括制备免疫原、动物体内免疫、制备人精子特异性转移因子等步骤。本口服制剂具有转移细胞免疫信息、介导细胞免疫反应、特异性地抑制和杀伤人精子的功能，并且能增强非特异性免疫功能；该口服制剂服用无过敏反应，实用安全，效果明显，使用后不会产生抗药性；本产品采用口服给药途径，服用不受条件的限制，既方便，又不影响有效成分本身的生物学活性，是一种安全、有效的制剂，具有潜在的社会价值和市场应用前景。

主权项

人精子特异性转移因子口服制剂及其制备工艺，其特征在于采用以下技术方案：免疫原的制备取健康人的精子，以无菌生理盐水洗涤3次后，配制成浓度为4.0×106/ml 的混悬液，在‑4℃以超声细胞粉碎仪破碎完全，储存于‑20℃冰箱，备用；免疫动物 （1）免疫前观察及检测免疫前3d，5只白兔均精神好、进食正常、无腹泻；抽取静脉血，以试管凝集法检测布氏杆菌抗体，效价均小于1：80；（2）免疫白兔以配制好的人精子抗原悬液免疫白兔，每周一次，免疫方式为背部、腹部、颈部及腋下多点皮下注射，第一次免疫剂量为免疫原1ml+弗氏完全佐剂0.5ml+弗氏不完全佐剂0.5ml；第二次和第三次仅注射2ml精子抗原悬液；第四次、第五次也是仅注射4ml精子抗原悬液；（3）一般情况观察每天观察免疫后白兔的精神、进食、有无腹泻等状况，以及注射局部有无溃疡、坏死；（4）抗体效价检测    末次免疫后一周，抽取白兔静脉血，以试管凝集试验检测血清中的精子抗体效价，达到1：1280为免疫成功；制备人精子特异性转移因子 （1）取材、匀浆：末次免疫后第10天处死白兔，取脾脏及淋巴结置于‑20℃冰箱备用；取免疫的白兔脾脏，剪去筋膜和大血管，用无菌生理盐水冲洗，以12000r/min低温匀浆2次，每次1min，制备匀浆液；（2）破碎、冻融、透析： 将匀浆液置于灭菌塑料离心管中，用超声细胞破碎仪破碎，取破碎液计数残存细胞，镜检确定破碎完全后，则将其置于冰箱冷冻4～6h，然后取出置于37℃水浴，完全融解后再冷冻，连续6次，最后装入10KD透析袋中，以两倍量的无菌双蒸水透析48小时，24小时换液一次，期间振动透析袋6次，收集透析液，以0.22μm滤器过滤除菌；（3）检定和分装：多肽含量测定（改良Lowry法）后，按1mg/ml多肽为1个单位，每小瓶分装2ml；储存于‑20℃冰箱备用。