北美红杉树组织培养方法

摘要

本发明公开了一种北美红杉树的组织培养方法。属农林苗木无性快速繁殖技术。该方法是将北美红杉树嫩枝经消毒，以普通茎尖进行诱导、增殖和生根培养，得到再生苗。实验证明：茎尖经诱导培养，分化率达100％，生根率为75%，移栽成活率在95%以上。本发明的有益效果是以抗性植株为取材母本，普通茎尖为外植体材料,,保证了优良性状的遗传稳定性；完善了消菌处理方法；同时筛选出了适合激素种类及浓度,解决了目前研究中存在的生产周期长，污染率高，生根率低，移栽成活率低的问题,成功建立了北美红杉树的组织培养体系体系。

主权项

一种北美红杉树组织培养方法，其特征是：利用北美红杉树嫩枝，将北美红杉树嫩枝清洗后，在无菌条件下，用质量浓度70%的酒精消毒30s后， 质量浓度0.1% HgCl2处理15min，无菌水冲洗4—5次，取1cm长的普通茎尖做外植体，接种诱导培养基，污染率低于5%，培养温度26±1℃，湿度70%，光照12h，光照强度2000Lx，培养时间为40天；然后截取1.5cm的茎段转接增殖培养基培养，培养温度26±1℃，湿度70%，光照12h，光照强度2000Lx；培养时间为30天；1.5cm的茎尖转接生根培养基：培养温度24±1℃，湿度70%，光照12h，光照强度2000Lx；培养时间为50天，得生根率为75%以上的组培苗；组培苗洗净根部培养基,移植于基质中，基质配方为：草炭土：珍珠岩 3∶1， 80℃下灭菌0.5小时，驯化温度24±1℃，湿度90%，光照12h，光照强度2000Lx，10天后逐渐降低湿度，增加光照，20天后移栽大田；所述的诱导培养基以MS为基础培养基，添加NAA 0.1mg/L,KT 0.5 mg/L，蔗糖3%，琼脂0.6%，pH 6.8；所述的增殖培养基以MS为基础培养基，添加NAA 0.3mg/L,KT 0.5 mg/L，BA 1.0 mg/L，蔗糖3%，琼脂0.6%，pH 6.8；所述的生根培养基以1/2MS为基础培养基，添加NAA 0.3mg/L,KT 0.5 mg/L，BA 1.0 mg/L，蔗糖2%，琼脂0.6%，pH 6.8。