一种基于纤维载体的蛋白质印迹海藻酸钙杂化凝胶膜的制备方法

摘要

本发明提供了一种基于纤维载体的蛋白质印迹海藻酸钙杂化凝胶膜的制备方法。制备方法是：将纤维放入丙烯酸水溶液中，加入阻聚剂硫酸亚铁铵，通入氮气，用紫外灯照射0.2～1小时，得到接枝聚丙烯酸的纤维，用氢氧化钠水溶液中和，得到聚丙烯酸钠接枝的纤维。配制质量百分比浓度分别为0.1％～5％的蛋白质、2％～5％的海藻酸钠和0.05％～5％的水溶性添加剂的混合水溶液，同时配制质量百分比浓度为1％～10％的氯化钙水溶液。将接枝聚丙烯酸钠的纤维浸泡入蛋白质、水溶性添加剂和海藻酸钠的混合水溶液中，随后将其立即放入氯化钙水溶液中交联0.5～2小时，最后洗脱掉模板蛋白质，得到基于纤维载体的蛋白质印迹海藻酸钙杂化凝胶膜。

主权项

一种基于纤维载体的蛋白质印迹海藻酸钙杂化凝胶膜的制备方法，该制备方法包括以下步骤：a)将纤维放入体积百分数为1％～50％的丙烯酸水溶液中，加入质量百分比浓度为0.5～3％的阻聚剂硫酸亚铁铵，通入氮气作保护，在室温下用500W的紫外灯照射0.2～1小时，取出后用水冲洗3～5次，除去未反应的单体和均聚物，得到接枝聚丙烯酸的纤维，随后用质量百分比浓度为1％～10％的氢氧化钠水溶液中和，得到聚丙烯酸钠接枝的纤维；b)向质量百分比浓度0.1％～5％的蛋白质溶液中加入海藻酸钠和水溶性添加剂，搅拌使其充分溶解，得到质量百分比浓度为2％～5％的海藻酸钠和0.05％～5％的水溶性添加剂的混合溶液，静置消泡后待用，同时配制质量百分比浓度为1％～10％的氯化钙水溶液；c)将步骤a)制备的接枝聚丙烯酸钠的纤维浸入蛋白质、水溶性添加剂和海藻酸钠的混合水溶液中0.5～2小时，取出后滴淌2～5分钟，用刮刀刮去粘附的过多粘稠溶液，使纤维表面的附着液尽量均匀，立即将其放入步骤b)配制的氯化钙水溶液中，交联0.5～2小时，用去离子水冲洗3～5遍，得到包含蛋白质的纤维接枝海藻酸钙杂化凝胶膜；d)将步骤c)制备的包含蛋白质的纤维接枝海藻酸钙杂化凝胶膜放置在锥形瓶中，在5～25℃的温度下，经过pH＝7.0～9.5的含1％CaCl2的Tris‑HCl溶液洗脱12～36h，得到基于纤维载体的蛋白质印迹海藻酸钙杂化凝胶膜。