一种用于快速检测人禽流感病毒的非诊断性双抗体夹心法

摘要

本发明公开了一种用于快速检测人禽流感病毒的非诊断性双抗体夹心法，用鼠单抗包被ELISA，用特异性兔多抗形成抗体抗原抗体复合物，用辣根过氧化物酶标记的羊抗兔形成检测抗体，通过采用双抗体ELISA法来进行检测人禽流感病毒。本发明用于快速检测禽流感病毒的双抗体夹心法，能够进行快速、有效的筛查诊断，有使用方便、检测准确的优点，适合在传染病防控领域推广应用，如用于入境人员筛查等。

主权项

一种用于快速检测人禽流感病毒的非诊断性双抗体夹心法，其特征在于，该方法具体为：1)人工改造合成突变的人禽流感病毒HA基因；2)设计扩增表达人禽流感病毒HA基因引物；3)禽流感病毒HA基因的PCR扩增；4)将目的片段与载体pET100/D‑TOPO连接，构建重组质粒；5)转化表达细胞；6)IPTG诱导重组蛋白的表达；7)重组蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体并纯化；8)重组蛋白免疫兔制备兔血清并纯化；9)单克隆抗体用于ELISA包被，制备的多克隆抗体作为检测抗体，辣根过氧化物酶标记的兔抗IgG作为二抗；10)建立双抗体夹心检测禽流感病毒抗原的方法。