一种检测纤维二糖脱氢酶活性的方法

摘要

本发明公开了一种检测纤维二糖脱氢酶活性的方法，包括以下步骤：首先取HAuCl4水溶液加热搅拌至沸腾，然后加入柠檬酸钠溶液，至混合溶液颜色转为清亮橘红色后停止加热，得含纳米金颗粒的溶液；将该溶液加入到缓冲溶液中，再加入纤维二糖溶液、氯金酸溶液和表面活性剂溶液，使纳米金、纤维二糖在混合溶液中的浓度分别控制在0.3～0.4nM和0.4～0.5mM，配得检测体系；将待测溶液按照体积比添加到检测体系中，反应后对产物体系进行光谱扫描，测得纳米金颗粒的表面等离子体共振吸收峰强度，再根据测得的强度数值和已建立的线性回归方程，得到待测溶液中纤维二糖脱氢酶的酶活。本发明的方法具有灵敏度更高、抗干扰能力更强等优点。

主权项

一种检测纤维二糖脱氢酶活性的方法，包括以下步骤：（1）纳米金颗粒的制备：取HAuCl4水溶液加热搅拌至沸腾，然后边搅拌边加入柠檬酸钠溶液，直至混合溶液颜色转为清亮橘红色后停止加热，继续搅拌，室温冷却，得含纳米金颗粒的溶液；（2）检测体系的制备：将上述含纳米金颗粒的溶液加入到缓冲溶液中，再加入纤维二糖溶液、氯金酸溶液和表面活性剂溶液，调节混合溶液中各组分的浓度，使所述纳米金颗粒、纤维二糖在混合溶液中的浓度分别控制在0.3nM～0.4nM和0.4 mM～0.5mM，配得检测体系；（3）酶活测定：将待测溶液按照1∶（4.5～5.5）的体积比添加到所述的检测体系中，混合均匀，待充分反应完全后，用紫外可见分光光度计对反应后的产物体系进行光谱扫描，测得产物体系中纳米金颗粒的表面等离子体共振吸收峰强度，再根据测得的表面等离子体共振吸收峰强度数值和已经建立的线性回归方程，得到待测溶液中纤维二糖脱氢酶的酶活。