发明名称 多重实时荧光PCR同时检测五种马铃薯病毒的方法
摘要 本发明公开了一种多重实时荧光PCR同时检测五种马铃薯病毒的方法,包括以下步骤:1)、分别合成马铃薯X病毒--PVX、马铃薯Y病毒--PVY、马铃薯卷叶病毒--PLRV、马铃薯A病毒--PVA和马铃薯S病毒--PVS的所对应的特异性引物;2)、抽提马铃薯样品的总RNA,反转录合成cDNA;3)、将步骤1)所述的所有特异性引物置于多重荧光定量PCR反应体系中,以步骤2)所述的cDNA为模板,进行PCR扩增;根据熔解曲线来分析马铃薯样品是否携带PVX、PVY、PLRV、PVA和PVS中的至少一种。
申请公布号 CN102618667A 申请公布日期 2012.08.01
申请号 CN201210080834.9 申请日期 2012.03.23
申请人 浙江理工大学 发明人 姜永厚;程菊会;董沁芳;郭江峰;丁先锋
分类号 C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I 主分类号 C12Q1/70(2006.01)I
代理机构 杭州中成专利事务所有限公司 33212 代理人 金祺
主权项 多重实时荧光PCR同时检测五种马铃薯病毒的方法,其特征是包括以下步骤:1)、分别合成马铃薯X病毒‑‑PVX、马铃薯Y病毒‑‑PVY、马铃薯卷叶病毒‑‑PLRV、马铃薯A病毒‑‑PVA和马铃薯S病毒‑‑PVS的所对应的特异性引物;2)、抽提马铃薯样品的总RNA,反转录合成cDNA;3)、将步骤1)所述的所有特异性引物置于多重荧光定量PCR反应体系中,以步骤2)所述的cDNA为模板,进行PCR扩增;根据熔解曲线来分析马铃薯样品是否携带PVX、PVY、PLRV、PVA和PVS中的至少一种。
地址 310018 浙江省杭州市下沙高教园区2号大街5号