一种安全快速从血液中提取基因组DNA的方法

摘要

本发明公开一种安全快速从血液中提取基因组DNA的方法，利用TritonX-100和SDS裂解血细胞，利用饱和NaCl沉淀蛋白质，通过离心使蛋白质分离出去，减少对溶液中DNA的机械剪切破坏；防止和抑制DNase对DNA的降解；排除有机溶剂、金属离子及其他核酸分子的污染；使蛋白质、多糖、脂类等降低到最低程度；提取的DNA具有一定的长度；纯化后存在对酶有抑制作用的物质。是一种绿色、快速、操作简单的从动物血液中提取基因组DNA的方法。

主权项

一种安全快速从血液中提取基因组DNA的方法，包括以下步骤：（1）取200‑300份抗凝血和400‑500份低盐缓冲液加入到离心管中充分混匀，室温下1000‑1500 RPM离心8‑12 min，弃上清；（2）加入400‑500份低盐缓冲液，充分混匀，室温下1000‑1500 RPM离心3‑8 min，重复上一步骤；（3）吸出上清，加入300份细胞裂解液，移液器吹打混匀，60‑70℃水浴8‑12 min；（4）加入70‑80份饱和NaCl，充分混匀，室温下10000‑12000 RPM离心3‑8 min，将上清转移到离心管中；（5）加入2倍体积室温下的无水乙醇，充分混匀，室温下10000‑12000 RPM离心2‑5 min，弃上清；（6）加入400‑600份冰浴的70%‑80%乙醇，颠倒混匀数次，10000‑12000 RPM离心1‑5 min，弃上清；（7）烘箱中60‑70℃干燥5‑15 min，加入80‑150 μl ddH2O，60‑70℃水浴10‑20 min，‑20 ℃保存。