一种快速检测DNA甲基化的试剂盒及方法

摘要

本发明公开了一种快速检测DNA甲基化的试剂盒及方法。本发明与传统方法相比做了以下四个方面的改进：1.DNA提取和DNA修饰同步完成；2.修饰液中添加硫化促进剂MBT和异硫氰酸胍，快速完成DNA提取和修饰过程；3.修饰反应采用短时间高温处理方法，使DNA呈解链状态，以充分暴露碱基，将未甲基化修饰的胞嘧啶转化为磺化尿嘧啶；4.对修饰后繁琐的透析脱盐步骤进行简化处理：将修饰处理后的产物转到核酸纯化柱中，再用清理液处理后洗脱，得到检测基因的甲基化PCR的DNA模板。本发明方法成本低廉、省时、重复性好，可直接用于检测各种组织细胞基因的甲基化水平，在早临床诊断等生物医学检测技术方面具有重要的使用价值。

主权项

一种检测DNA甲基化的试剂盒，包括修饰液、清理液和洗涤液；所述修饰液包括如下组分：亚硫酸氢钠4‑6M，亚硫酸氢铵3‑7M，氢醌3‑7mM，硫化促进剂1‑5mM，异硫氰酸胍2.5‑5.5M和缓冲液；所述硫化促进剂为2‑硫醇基苯骈噻唑剂，所述缓冲液为pH 5‑6的40‑60mM Tri s‑HCl。