一种芝麻愈伤组织诱导、分化和植株再生的方法

摘要

本发明公开了一种芝麻愈伤组织诱导、分化及植株再生的方法，属于生物技术领域。该方法以芝麻幼胚为外植体，利用筛选出最适愈伤组织诱导和分化培养基配方，获得胚性愈伤组织并成功分化最终形成完整植株。本发明以幼胚作为培养材料，建立了一套芝麻愈伤组织诱导、分化和植株再生的方法，利用该方法可以高效地获得愈伤组织并成功完成愈伤组织分化和植株再生过程，解决了我国芝麻愈伤组织分化及植株再生难题，为芝麻快速繁殖和转基因技术奠定了技术基础，促进我国芝麻组织培养技术的发展。

主权项

一种芝麻愈伤组织诱导、分化和植株再生的方法，其特征在于，通过以下步骤实现：A、外植体获得及预培养选取在大田生长的开花后12‑19天芝麻蒴果，先用70％酒精处理，再用3％次氯酸钠处理，然后用无菌水冲洗，之后在显微镜下剥取发育正常的芝麻幼胚，接种于幼胚生长培养基上，作为外植体预培养1周；培养条件为：温度25±2℃，光照强度3000‑5000lx，光照/黑暗时间为16h/8h；培养基由MS培养基、30g/L蔗糖、8g/L琼脂粉组成；B、愈伤组织的诱导及分化将以上预培养后的芝麻外植体放在愈伤组织诱导培养基上培养，一周后，可以看到在外植体伤口处长出愈伤；培养三周，愈伤组织变紧表层有茎芽小突起，一个月后愈伤组织上有绿芽点长出；诱导培养基由MS培养基、0.1mg/L萘乙酸、2mg/L6‑苄基嘌呤、30g/L蔗糖、8g/L琼脂粉组成；C、再生植株的获得等到绿芽点继续发育成大的绿色不定芽及芽丛时，切取丛生芽放于芽增殖培养基上培养，两周后绿芽长出短轴茎而形成苗；增殖培养基由1/2MS培养基、30g/L蔗糖、8g/L琼脂粉组成；以上所有组培养基灭菌前调pH值，灭菌后pH值处于5.6‑5.9之间。