外膜蛋白为靶基因的Taqman MGB probe实时荧光定量PCR检测体系确立方法

摘要

本发明是应用新兴分子生物学技术之一的Real-time PCR对鹦鹉热嗜衣原体(Chlamydophila psittaci)进行快速检测与诊断的方法。本发明检测体系采用以鹦鹉热嗜衣原体的外膜主蛋白基因(MOMP)的可变区III(VD3)的保守区域为基础设计了一对引物及相应的TaqMan MGB probe。该体系能对来自鸟类粪便中所存在的鹦鹉热嗜衣原体基因进行检测，其灵敏性明显高于普通PCR。由于Real-time PCR无需进行后PCR处理，因此可以避免因进行琼脂糖凝胶电泳而可能造成的交叉污染，从而提高检测的准确率和可信度。

主权项

一种以鹦鹉热嗜衣原体的外膜主蛋白为靶基因的特异性Taqman MGB probe实时荧光定量PCR检测体系的引物和探针，其特征在于，两条位于鹦鹉热嗜衣原体的MOMP基因的可变区域III位点的引物为：PsiMOMP5：5’‑TGTGATTCACAAACCAAGAGGCTATA‑3’；PsiMOMP3：5’‑CGAGGCCTACTTGCCATTCA‑3’；探针核苷酸序列为：5’(FAM)‑CTCGAATTTTCCTTTACCTATA‑(MGB)3’。