利用乳酸链球菌素发酵废液作部分氮源发酵生产凝乳酶的方法

摘要

利用乳酸链球菌素发酵废液作部分氮源发酵生产凝乳酶的方法，它涉及一种微生物发酵生产凝乳酶的方法。本发明解决了目前微生物发酵生产凝乳酶的成本高，乳酸链球菌素的发酵废液直接排放污染环境的问题。本方法：一、培养基的配制；二、米黑根毛霉种子液的制备；三、将米黑根毛霉种子液接种到三角瓶中；四、于37～38℃条件下培养96h，即得到凝乳酶。本发明做到了废物利用，减少了乳酸链球菌素发酵废液直接排放对环境造成的污染，降低了发酵生产凝乳酶的成本。应用于微生物发酵领域。

主权项

利用乳酸链球菌素发酵废液作部分氮源发酵生产凝乳酶的方法，其特征在于利用乳酸链球菌素发酵废液作部分氮源发酵生产凝乳酶的方法，按以下步骤进行：一、培养基的配制：将NaH2PO4、Na2HPO4、葡萄糖、高温淀粉酶、吐温80、玉米粉、玉米淀粉、乳酸链球菌素发酵废液和大豆组织蛋白溶解于水中配制培养基，其中NaH2PO4：3.25g/L，Na2HPO4：3.11g/L，葡萄糖：2.14g/L，高温淀粉酶：20g/L，吐温80：0.13g/L，玉米粉：30～80g/L，玉米淀粉：0～30g/L，乳酸链球菌素发酵废液：150～700g/L，大豆组织蛋白：0～20g/L；用质量浓度为5%～6%的氢氧化钠调pH至6.7～6.8，在0.14MPa压力下灭菌30min；二、米黑根毛霉（Rhizomucor miehei）种子液的制备：将米黑根毛霉按体积比4%的接种量接种到种子培养基中，于37～38℃条件下摇床培养20～24h，摇床的转速为260rpm；三、接种：将步骤一中配制好的培养基装入250ml的三角瓶中，将米黑根毛霉种子液按体积比2.5%的接种量接种到三角瓶中；四、培养：将三角瓶于37～38℃条件下放在摇床上培养，摇床的转速为260～280rpm，培养96小时，即得到凝乳酶；步骤一中玉米粉的含氮量的质量百分比含量为1.075%，乳酸链球菌素发酵废液的含氮量的质量百分比含量为0.24%，大豆组织蛋白的含氮量的质量百分比含量为8%；步骤二中制得的米黑根毛霉种子液的霉菌数为2～6×106cfu/ml；步骤三中培养基的装入量为三角瓶体积的20%；步骤二中的米黑根毛霉（Rhizomucor miehei）保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌种保藏编号为AS 3.4960。