含有不同细胞外基质的复合结构组织工程支架的构建方法

摘要

本发明属高分子材料技术领域和生物医学工程技术领域，具体涉及一种含有不同细胞外基质的复合结构组织工程支架的构建方法。本发明通过静电纺丝法制备血管支架；通过热压-盐析法，采用聚乳酸和聚己内酯的共混物制备多孔支架部分，并将血管支架引入至多孔支架中。本发明构建的复合结构的组织工程支架实现了在同一支架中构建不同细胞外基质。

主权项

一种含有不同细胞外基质的复合结构组织工程支架的构建方法，其特征在于采用静电纺丝制备血管支架，该装置由计量泵(1)、高压发生器和马达(2)以及管状接收装置(3)构成，计量泵(1)用于确定静电纺丝溶液的流速，高压发生器和马达(2)用于产生电压，并且带动接收装置(3)旋转，管状接收装置(3)用于血管支架的接收；具体步骤如下：(1)将聚合物溶于溶剂中，磁力搅拌溶解，溶液浓度8％～15％g/ml，将聚合物溶液在电压为8‑20KV，电纺距离为8‑20cm，流速为0.1‑5ml/h的条件下进行静电纺丝，采用可在马达带动下进行转动的金属棒作为管状接收装置制备血管支架，金属棒直径为0.5～2mm；所述聚合物为聚乳酸、聚乳酸‑己内酯共聚物以及聚乳酸、聚乳酸‑己内酯共聚物与胶原、明胶的共混物；(2)将步骤(1)中制备的血管支架从金属棒上脱下，真空干燥，采用直径比金属棒小0.1～0.2mm的棒穿入血管支架中支撑血管支架，以保证在热压过程中血管支架能保持其管状结构；所述支撑棒为不锈钢棒或不锈钢针管；(3)用标准筛筛取粒径为224～300μm的氯化钠作为致孔剂；(4)称取聚乳酸和聚己内酯溶解于可以溶解聚合物但不能溶解致孔剂、易挥发的溶剂，磁力搅拌使聚合物溶解，得到聚合物溶液；(5)将步骤(3)所得致孔剂加入到步骤(4)所得的聚合物溶液中，用玻璃棒搅拌使致孔剂均匀分散在聚合物溶液中，形成含有致孔剂的具有一定流动性的糊状混合物；(6)将步骤(5)所得糊状混合物分别倒入培养皿中，溶剂挥发后得到含有致孔剂的聚合物膜，所得聚合物膜放入真空烘箱中干燥，取出剪成适当大小；(7)将步骤(6)中所得的聚合物膜铺于模具底层，将步骤(2)中做的穿有支撑棒的血管支架放入在底层已铺聚合物膜的模具中，然后再在模具中铺入步骤(6)中所得的聚合物膜；(8)将模具放入热压机中热压，控制压力为6～10MPa，温度为60～80℃，热压时间为2.5～4min；(9)将热压后的支架从模具中取出，放入到可以溶解致孔剂但是不能溶解聚合物的溶剂中洗盐，每2～4小时更换一次溶剂，用硝酸银溶液检测无白色沉淀产生后，将血管支架的支撑棒取出，干燥支架。