发明名称 |
一种产生庆大霉素C1a的工程菌及其构建方法 |
摘要 |
本发明属于医药技术领域,涉及一种主要产生庆大霉素C1a的工程菌及其构建方法,是利用基因阻断技术对庆大霉素产生菌棘孢小单孢菌中的6’-C-甲基转移酶基因gntK进行破坏,以阻断庆大霉素C1,C2和C2a的合成,使其主要产生庆大霉素C1a和少部分的庆大霉素C2b。原始菌株中C1a,C2,C2a和C1的含量分别为6.5%,45.3%,20.1%和27.1%,而阻断株中的C1a和C2b的含量分别为94.0%和6.0%。本发明通过框架内删除失活的方法破坏棘孢小单孢菌中gntK基因,包括gntK基因阻断质粒的构建,阻断质粒转化棘孢小单孢菌,双交换菌株的筛选以及发酵产物的分析。本发明所构建的工程菌,不含有任何抗性标记,通过连续传代,庆大霉素C1a产量非常稳定。 |
申请公布号 |
CN102586146A |
申请公布日期 |
2012.07.18 |
申请号 |
CN201210032146.5 |
申请日期 |
2012.02.14 |
申请人 |
沈阳药科大学 |
发明人 |
夏焕章;倪现朴;李昊 |
分类号 |
C12N1/20(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12P19/50(2006.01)I;C12R1/01(2006.01)N |
主分类号 |
C12N1/20(2006.01)I |
代理机构 |
沈阳杰克知识产权代理有限公司 21207 |
代理人 |
李宇彤 |
主权项 |
一种基因工程菌,其特征是,该菌株主要产生庆大霉素C1a组分,将该基因工程菌命名为Micromonospora purpurea gntK‑,其保藏编号为:CGMCC NO.4838。 |
地址 |
110016 辽宁省沈阳市沈河区文化路103号 |