重组非糖基化人促红细胞生成素及其聚乙二醇修饰化产物的生产方法及用途

摘要

本发明公开了一种非糖基化人促红细胞生成素的高效重组表达与纯化方法，本发明方法将h-ngEPO基因与分子伴侣SUMO序列融合，构建了一种新型的SUMO-rh-ngEPO融合基因表达载体，将该载体转让宿主菌中，从而建立了一种工程菌，通过培养该工程菌并诱导表达SUMO-rh-ngEPO融合蛋白，切除SUMO部分，即可得到rh-ngEPO蛋白。该方法实现了rh-ngEPO蛋白在细胞质内的可溶性表达及大规模纯化，所得rh-ngEPO蛋白活性高。本发明还提供了非糖基化人促红细胞生成素的聚乙二醇修饰化方法，通过该修饰方法得到的聚乙二醇修饰化非糖基化人促红细胞生成素的半衰期明显延长，且其促红细胞增殖活性也得到显著的提高，可广泛应用于制备促红细胞生成类药物。

主权项

一种融合基因，其编码SUMO‑rh‑ngEPO融合蛋白。