基于酶促反应非水相合成麦芽糖醇酯及其纯化制备的方法

摘要

一种基于酶促反应非水相合成麦芽糖醇酯及其纯化制备的方法，是在非水相中，固定化脂肪酶催化麦芽糖醇和脂肪酸合成麦芽糖醇酯，再通过硅胶柱层析和半制备液相对麦芽糖醇酯进行纯化制备。用本发明方法合成的麦芽糖醇酯主要是麦芽糖醇单酯，纯化制备后，产品纯度较高，其中麦芽糖醇辛酸单酯纯度为91～93％，麦芽糖醇月桂酸单酯纯度为94～97％，麦芽糖醇硬脂酸单酯纯度为93～95％，麦芽糖醇油酸单酯纯度为90～92％。该发明顺应乳化剂向天然、营养、多功能、低热量发展趋势，提供了一种绿色环保，高选择性的酶促合成方法合成麦芽糖醇酯，并通过硅胶柱层析和半制备液相制备得到一系列高纯度的麦芽糖醇单酯产品，提高了麦芽糖醇酯的应用针对性，丰富了乳化剂种类。

主权项

基于酶促反应非水相合成麦芽糖醇酯及其纯化制备的方法，其特征是在非水相中，脂肪酶催化麦芽糖醇和脂肪酸合成麦芽糖醇酯，再通过硅胶柱层析和半制备液相对麦芽糖醇酯进行纯化制备，所述方法具体包括以下步骤：(1)酶法合成麦芽糖醇酯反应溶剂为二甲基亚砜(DMSO)∶叔戊醇＝1∶4(v/v)，麦芽糖醇∶脂肪酸＝1∶3‑1∶5(m/m)，将原料置于二甲基亚砜中，待全部溶解后，加入4倍体积的叔戊醇，平衡2h‑3h，在反应液中加入10g/L‑20g/L的固定化脂肪酶NOV435，0h‑24h后加入60g/L的4A分子筛除去反应生成的水份。反应液置于带盖的三角瓶中，于50℃‑60℃，180rpm恒温振荡反应24h‑120h，4A分子筛在250℃下活化6h，反应溶剂经分子筛脱水48h以上备用；(2)麦芽糖醇酯的纯化制备将反应完后的反应液过滤除去分子筛和固定化脂肪酶，旋转蒸发除去溶剂，浓缩后的反应液上硅胶柱进行层析分离，洗脱剂为正己烷∶异丙醇∶甲醇，流速为2ml/min，洗脱液进行分部收集，采用HPLC和质谱对层析样品进行快速分析，合并收集液。将硅胶柱纯化后的收集液浓缩后进行半制备液相制备，半制备色谱条件为：C18制备柱，流动相为甲醇/水，流速为1ml/min。将制备得到的收集液浓缩除去甲醇，剩余液体经冷冻干燥得到麦芽糖醇酯的固体纯品，麦芽糖醇酯纯度为90～97％。