气液接触式卷烟全烟气暴露下细菌回复突变试验方法

摘要

一种气液接触式卷烟全烟气暴露下细菌回复突变试验方法，属于卷烟烟气安全性评价技术领域。方法为：a、培养TA98菌株，菌液浓度要求600nm下的吸光值在0.2-0.3之间；b、细菌混合液中pH7.4的磷酸盐缓冲溶液是26mmol/L，鼠肝S9液的体积比是1％；c、细菌混合液按每瓶10mL分装至ZL201120063251.6的全烟气暴露装置的瓶内并与吸烟机连接；d、按国标GB/T 16450设定卷烟抽吸参数；e、按步骤d设定的参数进行卷烟的抽吸，使全烟气暴露瓶内的细菌混合液分别暴露于不同的卷烟烟气暴露时间下；f、暴露完毕，取下全烟气暴露瓶，用微量波动法进行细菌回复突变试验；j、结果与分析。本发明的优点在于：易于操作，成本低廉，能快速实现细菌的卷烟全烟气暴露检测，为卷烟烟气安全性评价提供技术支持。

主权项

一种气液接触式卷烟全烟气暴露下细菌回复突变试验方法，其特征在于该方法的步骤如下：a、按常规方法培养TA98菌株，菌液浓度要求600nm下的吸光值在0.2‑0.3之间；b、配制细菌混合液，改进之处在于：pH7.4的磷酸盐缓冲溶液是26mmol/L，鼠肝S9液的体积比是1％；c、将细菌混合液分装至ZL201120063251.6的全烟气暴露装置的瓶内，每瓶10mL，并将全烟气暴露瓶和直线型吸烟机连接；d、参照国标GB/T 16450要求，在吸烟机控制面板上设定卷烟抽吸参数；e、按照步骤d设定的参数进行卷烟的抽吸，使全烟气暴露瓶内的细菌混合液分别暴露于不同的卷烟烟气暴露时间下；f、暴露完毕，取下全烟气暴露瓶，用微量波动法进行细菌回复突变试验，即：分别将暴露瓶内的细菌混合液接种至96孔细胞培养板内，于37℃下培养16h后，加入显色剂溴甲酚紫溶液，于37℃下继续培养48‑72h后观察，孔内培养液由蓝紫色变为黄色的为阳性孔；j、结果与分析：将烟气暴露组的阳性孔数与自发回复突变组的相比较，阳性孔数是自发回复突变组阳性孔数的2倍以上的即为阳性反应；绘制卷烟烟气不同的暴露时间下诱发的阳性孔数。