“三步法”生产“龙头凤尾”优质铁皮石斛材料的方法

摘要

本发明公开一种“三步法”生产“龙头凤尾”优质铁皮石斛材料的方法。该方法包括胚培养直接成苗、幼苗温室内穴盘种植和半成苗附生树干栽培等三个步骤，简化了铁皮石斛生产工艺技术，缩短了育苗时间，提高了铁皮石斛试管种苗的质量和移栽成活率。本方法中试管苗的生产时间为6～7个月，而常规的试管育苗时间需要10～12个月。通过本发明得到的铁皮石斛药材茎干粗短，石斛多糖含量高达36％～48％，其外型形态体现为“龙头凤尾”特征，是加工“龙头凤尾”铁皮枫斗的必备原料。本发明中的半成苗附生树干技术十分适合山区农户栽培铁皮石斛，投资小，收益高，农户不需建立温室，只要购买穴盘苗，且栽培技术容易掌握，该技术是服务“三农”的实用技术。

主权项

一种“三步法”生产“龙头凤尾”优质铁皮石斛材料的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）胚培养成苗：将铁皮石斛成熟果荚表面消毒；在无菌操作条件下，切开果荚，收集种胚，将种胚均匀铺开于LCY培养基表面，试管培育，暗光下培养10～20天，种胚膨大，再按照白天12小时给予1000～1500Lux光照；当种胚萌发成绿色小芽，将绿色小芽转接到LVB培养基上培养至生根；然后将生根苗移植到LPY培养基上，待每簇苗长成5～6条根系，苗高9～10cm，将试管苗移入温室炼苗，控制光照1500～3000Lux，温度23～25℃；LCY培养基为在LV培养基中添加椰子水和酵母提取物，其中每升LV培养基中含有质量百分比10～15%椰子水和2000～3000毫克酵母提取物；LVB培养基为在LV培养基中添加香蕉泥，其中每升LV培养基中含有质量百分比10～15%香蕉泥；LPY培养基为在LV培养基中添加去皮土豆泥和酵母提取物，其中每升LV培养基中含有质量百分比10～15%去皮土豆泥和2000～3000毫克酵母提取物；LV培养基的组成为每升含有磷酸钙180～220毫克，硝酸钾500～550毫克，磷酸二氢钾230～270毫克，七水硫酸镁230～270毫克，硫酸铵480～520毫克，四水硫酸锰50～100毫克，七水硫酸亚铁25～30毫克，乙二氨四乙酸二钠35～40毫克，烟酸0.5毫克，盐酸硫胺素0.1毫克，盐酸吡哆醇0.5毫克，甘氨酸2毫克，蔗糖20000～30000毫克以及卡拉胶6000毫克；（2）幼苗温室内穴盘移栽：洗净温室移栽苗根系上的培养基，用水苔顺根包裹移栽到穴盘中，置于温室苗床上培养；施质量比3000～4000倍的花多多营养液，1次/周，保持温室内通风，控制光照1500～3000Lux，温度23～28℃，相对湿度75～90%，至移栽苗的根系布满穴盘； （3）半成苗附生树干栽培：在粤北地区选择海拔高度为200～800米的林木区，清除地上杂草，再进行地面消毒；选择树干直径为20cm以上的树，去除小枝条，清洁树干，树干作为铁皮石斛附生栽培的支撑体；将步骤（2）得到的穴盘苗取出，附树干栽培，竹签钉植，用铁筛网环绕固定，定植株距为5～10cm，行距为20～25cm，株间空隙用水苔填充；保持空气相对湿度60～80%，温度为自然温度，常规管理，2年后采收二年生的铁皮石斛老茎，即得到“龙头凤尾”优质铁皮石斛材料。