一种豇豆重花叶病毒反转录PCR分子检测试剂盒及其检测方法

摘要

本发明提供一种豇豆重花叶病毒反转录PCR分子检测试剂盒及其检测方法，属于生物技术领域。试剂盒包括引物CPSMVf和CPSMVr；CPSMVf为5’-ACACARGTNMGNCCNGATAC-3’，R＝A或G，N＝I，M＝A或C；CPSMVr为5’-GCTACNGGACTRCTRCTCA-3’，N＝I，R＝A或G。检测步骤：提取样品RNA，以CPSMVr为引物进行反转录反应；以反转录产物为模板，CPSMVf和CPSMVr为引物进行PCR反应，并进行电泳，若样品RNA在356bp处有特异性扩增条带，则该样品感染了CPSMV。该方法具有快速、操作简便，特异性好、重复性高等优点。

主权项

一种豇豆重花叶病毒反转录PCR分子检测试剂盒，包括如下试剂：dNTP混合物、无RNase的ddH2O、5×RT Buffer、RNase抑制剂、反转录酶、10×PCR Buffer、MgCl2溶液、上游引物CPSMVf、下游引物CPSMVr、Taq DNA聚合酶和ddH2O；所述CPSMVf序列为5’‑ACACARGTNMGNCCNGATAC‑3’，其中R＝A或G，N＝次黄嘌呤核苷酸，M＝A或C；所述CPSMVr序列为5’‑GCTACNGGACTRCTRCTCA‑3’，其中N＝次黄嘌呤核苷酸，R＝A或G。