大麦花药快速培养法及所用培养基

摘要

本发明公开了一种大麦花药培养基，包括预处理培养基、诱导培养基以及分化/生根培养基。本发明还同时提供了利用上述大麦花药培养基所进行的大麦花药快速培养法，包括以下步骤：1)在田间取小孢子发育处于单核中期的麦穗，取出穗子里的花药，放入预处理培养基上黑暗环境下培养3～5天；2)将预处理后花药转移到诱导培养基上黑暗环境下培养4～5周；3)将步骤2)诱导所得的愈伤组织和苗转移至分化/生根培养基上；于22～25℃光照培养，光照时间每天12小时，光照强度为40～60μmol/m2/s；培养3～4周后，得生根绿苗。采用本发明的方法能显著提高大麦花药培养的效率。

主权项

大麦花药培养基，其特征是：包括预处理培养基、诱导培养基以及分化/生根培养基；所述预处理培养基由以下含量的组分组成：甘露醇175～185g/L，琼脂14～16g/L，其余为蒸馏水；所述诱导培养基的制备方法如下：每升诱导基液先调节至pH为5.7～5.9，然后加入14～16g的琼脂；接着进行高温灭菌处理，待温度回落至50～60℃时，再加入过滤灭菌后的浓度为740～760mg/ml的谷氨酰胺溶液、浓度为90～110mg/ml的肌醇溶液、浓度为0.35～0.45mg/ml的维生素B1溶液、浓度为0.9～1.1mg/ml的吲哚乙酸溶液和浓度为0.9～1.1mg/ml的6‑苄基氨基嘌呤溶液各1ml；所述诱导基液由以下含量的组分组成：KNO31850～1950mg/L，NH4NO3160～170mg/L，CaCl2·2H2O 430～450mg/L，KH2PO4160～180mg/L，MgSO4·7H2O 360～380mg/L，NaFeEDTA 35～45mg/L，H3BO36.0～6.4mg/L，MnSO4·4H2O 22～22.5mg/L，ZnSO4·7H2O 8.5～9.0mg/L，Na2MoO4·2H2O 0.20～0.30mg/L，KI 0.80～0.90mg/L，CuSO4·5H2O 0.020～0.030mg/L，CoCl2·6H2O 0.020～0.030mg/L，麦芽糖90～110g/L，其余为蒸馏水；所述分化/生根培养基的制备方法为：在每L MS基本培养基内加入蔗糖18～22g后，先调pH至6.4～6.6，再加入植物凝胶3.5～4.5g；最后高温灭菌。