主权项 |
一种波棱瓜植物的组织培养方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)外植体的消毒:取带腋芽的波棱瓜植物的幼茎为外植体,将该外植体先用肥皂水进行清洗,再用流水反复冲洗,再放入75%的酒精中浸5秒后,用无菌水冲洗3遍,然后用0.1%升汞进行消毒,最后用无菌水清洗三遍以上待用;(2)芽的诱导:将经上述处理的茎段切成单芽茎段,分别接种于添加了蔗糖和铁盐的MS培养基中,在22±2℃、12‑14小时/天光照下培养7‑15天;培养基配方为:MS培养基+0.5mg/L 6‑BA+40g/L蔗糖+6g/L琼脂+0.1g/L肌醇+铁盐25ml/L,pH5.8;(3)芽的增殖:将上述经诱导的芽接种于分化培养基中,在22±2℃、12‑14小时/天光照下培养20‑25天;培养基配方为:MS培养基+1.0mg/L 6‑BA+40g/L蔗糖+6g/L琼脂+0.1g/L肌醇+铁盐25ml/L,pH5.8;(4)生根诱导:选取健壮的、1cm‑3cm高的丛生无根苗,将其切分为单芽,转至生根培养基中诱导生根,得到完整试管植株;生根培养基配方为:1/2浓度的MS培养基+0.5‑1.0mg/L IBA+1.0‑1.5mg/L IAA,波棱瓜雌株植物的无根苗在该培养基中生根整齐,苗健壮,生根率达90%以上。 |