发明名称 一种模拟体内环境诱导脂肪基质细胞为神经干细胞的方法
摘要 一种模拟体内环境诱导脂肪基质细胞为神经干细胞的方法,(1)选取离体鼠类脑组织中海马、大脑皮层或小脑部位,获得其可溶性物质;(2)选取离体鼠类皮下脂肪组织,获得脂肪基质细胞;(3)取脂肪基质细胞进行预处理后获得的重悬后脂肪基质细胞,加入培养基和鼠类脑组织中海马可溶性物质、大脑皮层或小脑可溶性物质,将细胞悬液培养后,通过鼠类脑组织中的海马、大脑皮层或小脑可溶性物质诱导脂肪基质细胞成神经干细胞。该方法采用鼠类脑组织的海马、大脑皮层和小脑部位等外环境所含可溶性物质作为生理诱导剂,诱导鼠类皮下组织中的脂肪基质细胞为神经干细胞,实现在生理条件下促使和加快种子细胞的形成。
申请公布号 CN102559588A 申请公布日期 2012.07.11
申请号 CN201110410788.X 申请日期 2011.12.09
申请人 姜晓丹;李鹏 发明人 姜晓丹;李鹏
分类号 C12N5/077(2010.01)I;C12N5/0797(2010.01)I 主分类号 C12N5/077(2010.01)I
代理机构 广州知友专利商标代理有限公司 44104 代理人 宣国华
主权项 一种模拟体内环境诱导脂肪基质细胞为神经干细胞的方法,其特征是含以下步骤:(1)选取离体鼠类脑组织中的海马、大脑皮层或小脑部位,置于DMEM F12培养基中,经摇床震荡和离心处理后,取上清液,过滤后灭菌获得鼠类脑组织中的海马、大脑皮层或小脑可溶性物质,保存备用;(2)选取离体鼠类皮下脂肪组织,采用I型胶原酶消化后,使用胎牛血清或新牛血清终止消化,过滤,取滤液,离心后弃去上清液,在下层物质中加入培养基重悬细胞,接种,在培养基和体积百分含量为10%的胎牛血清或新牛血清中培养后,细胞扩增至第二代,经流式鉴定确认为脂肪基质细胞;(3)取步骤(2)中获得的脂肪基质细胞进行预处理后获得的重悬后脂肪基质细胞,取出重悬后脂肪基质细胞,加入培养基和步骤(1)中制备的鼠类脑组织中海马、大脑皮层或小脑可溶性物质,将细胞悬液培养后,通过鼠类脑组织中的海马、大脑皮层或小脑可溶性物质诱导脂肪基质细胞成神经干细胞。
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