灵敏的检测配方奶粉中三聚氰胺的毛细管电泳方法

摘要

本发明属于分析检测技术领域，公开了二种灵敏检测配方奶粉中三聚氰胺的毛细管电泳方法。采用场放大进样联用区带毛细管电泳法及场放大进样联用胶束扫集法检测配方奶粉中三聚氰胺的方法。两种方法使三聚氰胺的富集灵敏度与普通的区带毛细管电泳相比提高了2～3个数量级，检出限分别降低为2.8μg/kg和1.8μg/kg。本发明采用低电渗流下的电动进样，对进入毛细管中的样品有选择性，受样品基质影响小，不需要如液相色谱等方法中复杂的样品预处理过程，适用于多种样品中三聚氰胺的检测；灵敏度高，比已有的液相色谱、荧光光谱法的检出限降低了两到三个数量级；所用的缓冲液主要是水溶液，无需大量使用有机溶剂，污染小，环境友好；所需溶剂和样品用量小，使用的空心毛细管柱价格便宜，分析成本低。

主权项

场放大进样‑区带毛细管电泳条件下测定配方奶粉中的三聚氰胺的方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)将三聚氰胺标准品溶解在20％甲醇水溶液中，配制成浓度为2.000g/L的储备液。避光4℃保存。使用时根据需要稀释成不同浓度的标准液。在普通的区带毛细管电泳(CZE)和场放大进样联用CZE(FASS‑CZE)的模式下，在最佳检测条件下，对三聚氰胺的标准品进行毛细管电泳分析。得到标准谱图。(2)采用CZE和FASS‑sweep MEKC方法在最佳检测条件下，对样品的提取液进行分析，获得样品的毛细管电泳图。(3)根据三聚氰胺的校正曲线方程，计算出步骤(2)中样品中三聚氰胺的含量。所述最佳检测条件为：CZE电泳条件：压力进样3kPa，进样时间15s，运行缓冲液：20mmol/L磷酸二氢钠(pH 2.2)‑10％(体积分数)甲醇，三聚氰胺溶液(8mg/L)配制在运行缓冲液中。权利要求1所述的FASS‑CZE方法：FASS‑CZE电泳条件：首先在毛细管内充满运行缓冲液，然后在毛细管中加压注入一段水柱(40％乙腈)(200s，3kPa)，样品采用电动进样(80s，20kV)，运行缓冲液组成为120mmol/LNaH2PO4缓冲液(pH 2.2)‑10％(体积分数)甲醇；分离电压20kV，样品基质为0.1mmol/LNaH2PO4(pH 2.2)‑20％乙腈；测量波长230nm；样品(2mg/L)配制在样品基质中。根据权利要求1，步骤(2)中配方奶粉中三聚氰胺的样品预处理过程按照以下步骤进行：分别称取2.000g配方奶粉，加3mL乙腈，超声10min，以7000r/min离心6min，吸出上清液，在下层沉渣中再加3mL乙腈，操作方法同上，反复提取三次，合并上清液，并将其放入冰箱内冷冻5min，取出后用普通滤纸过滤，然后用0.45μm过滤膜过滤得样品溶液。所有溶液进入毛细管前均经过0.45μm过滤膜过滤，经超声脱气后使用。根据权利要求1所述FASS‑CZE测定配方奶粉中的三聚氰胺的方法，其特征在于：在最佳的富集检测条件下，FASS‑CZE检测三聚氰胺的富集倍数比CZE提高了700倍，方法的线性范围分别为5‑500μg/L，检出限为2.8μg/kg(S/N＝3)，FASS‑CZE日内迁移时间和峰面积的相对标准偏差(RSD)分别小于5.2％，4.5％，日间精密度分别为8.7％和5.3％。