一种整合牛NRAMP1巨噬细胞特异性表达载体/牛成纤维细胞及其方法

摘要

一种整合牛NRAMP1巨噬细胞特异性表达载体/牛成纤维细胞及其方法，构建了一种包含NRAMP1巨噬细胞特异性表达载体pSP-NRAMP1-HA，以及一种基于该载体的包含NRAMP1基因的秦川牛成纤维细胞系，利用该细胞系作为核供体细胞的方法，为解决秦川牛布氏杆菌病的转基因牛提供坚实的基础。本发明通过脂质体转染法将外源性表达载体pSP-NRAMP1-HA导入牛成纤维细胞，经G418筛选获得阳性细胞，经PCR鉴定，证实目的基因NRAMP1整合到牛成纤维细胞的基因组中；最后将整合有NRAMP1基因的牛成纤维细胞作为核供体移入牛去核卵母细胞，获得转基因克隆胚。

主权项

一种整合牛NRAMP1巨噬细胞特异性表达载体，其特征在于：其包含巨噬细胞特异性启动子SP以及HA标签的目的基因NRAMP1。