一种基于M基因的尼帕病毒荧光RT-PCR检测方法

摘要

本发明公开了一种基于M基因的尼帕病毒荧光RT-PCR检测方法及其试剂盒，本方法采用一步法荧光RT-PCR方法检测猪样本中的尼帕病毒，操作简便、快速且具有较高的特异性和敏感性；本方法阳性对照样本采用没有感染性的假病毒，性质稳定，无需培养活病毒，具有良好的实验室生物安全性。

主权项

一种基于M基因的尼帕病毒荧光RT‑PCR检测方法，其特征在于选取尼帕病毒基因组M基因的保守区序列作为PCR扩增的靶序列，合成特异性的引物和Taqman‑MGB探针对尼帕病毒进行定性检测，其特征在于所述引物对和Taqman‑MGB探针序列为：NIPHAMP 1：5’‑GATGGACATCAATCCTTG‑3’，NIPHAMP2：5’‑CTCTCTTGGAACAGAAGG‑3’，NIPHAMProbe：5’‑CTGCTACTCGGCTGATCTCACA‑3’；探针序列的5’端标记荧光发光基团，3’端标记末端连接MGB的非荧光淬灭基团。