用双指示线免疫层析半定量诊断盐酸克伦特罗的方法

摘要

本发明公开了一种生物工程技术领域的检测方法，具体是一种用双指示线免疫层析半定量诊断盐酸克伦特罗的方法。盐酸克伦特罗为我国瘦肉精的主要投用类型，为一种肾上腺素类兴奋剂，可导致人体心悸、肌肉震颤等症状，严重者可导致死亡。我国明令禁止使用盐酸克伦特罗作为饲料添加剂，且出台了相关检测标准。临床检测盐酸克伦特罗主要通过气相色谱法、高效液相色谱方法、液相色谱-质谱/质谱法及ELISA方法，但操作方法繁琐、耗时较长，并且需要昂贵的检测仪器设备及专门的检测操作人员。免疫胶体金技术近年来发展迅速，得到了广泛应用，如传染病、早孕、癌症等的检测。本发明采用胶体金免疫层析法，建立快速检测盐酸克伦特罗的方法。并且能够通过两种T线以初步定量肉品中的盐酸克伦特罗的含量，满足市场需求。

主权项

一种用双指示线免疫层析半定量诊断盐酸克伦特罗的方法，其特征在于，采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，标记抗Clen单克隆抗体并均匀涂布于胶体金垫上，作为示踪标记物。在硝酸纤维素膜上，两个不同浓度的偶联BSA的Clen抗原固定于两个检测线(即T线)，羊抗鼠二抗固定于质控线(即C线)。依次将样本垫、胶金垫、硝酸纤维素膜和吸水滤纸组装，剪成胶体金试纸并装入检测卡中。金标抗体与相应的抗原、抗体发生特异性结合被截留而显色，根据T线、C线显色与否来判断阴阳性结果。