用双指示线免疫层析半定量诊断心肌肌钙蛋白Ⅰ的方法

摘要

本发明公开了一种生物工程技术领域的检测方法，具体是一种用双指示线免疫层析半定量诊断心肌肌钙蛋白I的方法。急性心肌梗塞(acute myocardial infarction，AMI)是冠心病中的一个非常严重的类型，是中老年人的常见急症，死亡率较高，据统计，约有1/3-1/2的患者在送至医院之前死亡。在今后20年内，急性心肌梗塞将是全世界范围内患者死亡的头号病因。心肌肌钙蛋白I是目前公认的、特异性最高且持续时间最长的诊断心梗的可靠指标，目前，临床上常用的cTnI检测的方法为酶联免疫吸附试验和放射性免疫法等方法，上述方法费时、费力、不利于普及而且费用昂贵。免疫胶体金技术近年来发展迅速，得到了广泛应用，如传染病、早孕、癌症等的检测。本发明采用胶体金免疫层析法，建立快速检测cTnI的方法。并且能够半定量检测1ng/mL～5ng/mL这一cTnI灰区范围。

主权项

一种用双指示线免疫层析半定量诊断心肌肌钙蛋白I的方法，其特征在于，采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，标记抗cTnI单克隆抗体1并均匀涂布于胶体金垫上，作为示踪标记物。在硝酸纤维素膜上，两个不同浓度的cTnI单克隆抗体2固定于两个检测线(即T线)，羊抗鼠二抗固定于质控线(即C线)。依次将样本垫、胶金垫、硝酸纤维素膜和吸水滤纸组装，剪成胶体金试纸并装入检测卡中。金标抗体与相应的抗原、抗体发生特异性结合被截留而显色，根据T线、C线显色与否来判断阴阳性结果。