一种制备香石竹和石竹杂交后代的方法

摘要

本发明公开了一种制备香石竹(Dianthus caryophyllus)和石竹(Dianthuschinensis)原生质体杂交后代的方法，所述方法包括：(1)分别获取香石竹和石竹的原生质体；(2)将香石竹的原生质体与石竹的原生质体进行原生质体不对称融合，获得融合的原生质体；和(3)培养所述融合的原生质体，使之再生为杂种植株。本发明人首次找到了适合于培育香石竹和石竹原生质体杂交后代的方法，克服了现有技术中难于获得香石竹和石竹杂交后代的缺陷；并通过杂交条件的优化，首次培育出株型好、观赏性强、亩种植量高的新型杂交后代。

主权项

一种制备香石竹和中国石竹原生质体杂交后代的方法，其特征在于，所述方法包括：(1)分别获取香石竹和中国石竹的原生质体；(2)将香石竹的原生质体与中国石竹的原生质体进行原生质体不对称融合，获得融合的原生质体；和(3)培养所述融合的原生质体，使之再生为植株，所述植株是香石竹和中国石竹原生质体杂交后代，其中，步骤(2)中，不对称融合的方法是：(i)将香石竹的原生质体用碘乙酰胺处理，将中国石竹的原生质体用γ‑射线处理；或将香石竹的原生质体用γ‑射线处理，将中国石竹的原生质体用罗丹明‑6G处理；或将香石竹的原生质体用罗丹明‑6G处理，将中国石竹的原生质体用γ‑射线处理；从而分别获得经诱变处理的香石竹和中国石竹的原生质体，其中，碘乙酰胺的浓度是4±1mmol/L；γ‑射线的吸收剂量是60±10戈瑞；罗丹明‑6G的浓度是25±5μg/ml；(ii)分别将密度为(1～15)×105个/ml经诱变处理的香石竹原生质体与密度为(1～15)×105个/ml经诱变处理的中国石竹原生质体混合，获得混合的原生质体，其中经诱变处理的香石竹原生质体与经诱变处理的中国石竹原生质体以1∶1混合；(iii)在所述混合的原生质体中加入含有聚乙二醇的融合液进行融合；和(iv)分离发生融合的原生质体。