毛花猕猴桃组培快速繁殖方法

摘要

本发明公开了毛花猕猴桃组培快速繁殖方法，属于植物组织培养技术领域。该方法包括：(一)组培培养基的配制；(二)外植体的选取与灭菌；(三)诱导培养；(四)增殖培养；(五)生根培养；(六)组培苗的驯化与移栽等步骤。该方法培养基针对性强、适用性好，外殖体初代幼芽的诱导率达80％以上；继代幼芽的增殖率达2～7倍，20～30天苗高可达2～5厘米，组培苗素质提高，生根率达95％以上，移栽成活率95％以上。本发明可在果树苗木企业中推广应用。

主权项

毛花猕猴桃组培快速繁殖方法，其特征在于该方法按以下步骤进行：(一)组培培养基的配制：包括基本培养基及各阶段培养基的组分与各组分在每升中所含重量为：1)基本培养基：MS或1/2MS培养基，其中，蔗糖或白糖25～35g/L，琼脂7～9g/L，pH5.0～6.2；2)诱导培养基：MS+6‑BA 2.0～5.0mg/L+NAA 0.1～0.5mg/L；3)增殖培养基：MS+6‑BA1.0～5.0mg/L+NAA 0.1～0.5mg/L或IBA0.1～0.5mg/L；4)生根培养基：MS或1/2MS+IBA0.05～1.0mg/L和/或NAA 0.1～0.5mg/L+活性炭1g/L；(二)外植体的选取与灭菌：取毛花猕猴桃半木质化茎段为外植体，经自来水冲洗1h、70％酒精消毒30～40s、0.1％升汞水溶液灭菌5～10min或2％次氯酸钠水溶液灭菌10～15min后，以无菌水冲洗并用无菌滤纸吸去表面水分后，备用；(三)诱导培养：将灭菌后外植体切成含单芽切段，接种在诱导培养基上，在温度25℃±3℃，光强2000lux±500lux，光照时间16h/d的无菌环境下，经30～35天培养至外植体诱导萌发出初代幼芽或丛芽；(四)增殖培养：将初代幼芽或丛芽接种在增殖培养基上，在同上条件下经25～45天培养至分化形成2～7倍、芽长2～5厘米的继代幼芽或丛芽；(五)生根培养：将继代幼芽或丛芽接种到生根培养基中，在同上条件下经10～15天培养至幼苗基部长出5～10条毛细根系，再经20～30天培养至根长3～7厘米；(六)组培苗的驯化与移栽：当组培苗长3～6厘米时，移至组培室外先将 组培瓶盖拧松培养2天，后开盖培养5天，洗清根部培养基移栽入泥炭∶珍珠岩＝4∶1的基质中，置于大棚温室中，浇水、保湿至组培苗成苗、出圃。