选择高水平表达蛋白质的宿主细胞

摘要

本发明提供了一种DNA分子，其包含编码可选择标记多肽的开放阅读框序列，其中编码链中的所述DNA分子包含具有GTG起始密码子或TTG起始密码子的可选择标记多肽的翻译起始序列，其中，与编码所述可选择标记蛋白质的原始开放阅读框序列相比，编码所述可选择标记蛋白质的开放阅读框序列被替换其至少一半的CpG二核苷酸。

主权项

一种DNA分子，其包含编码可选择标记多肽的开放阅读框序列，所述可选择标记多肽提供针对Zeocin或针对新霉素的抗性，其特征在于：所述DNA分子在所述可选择标记多肽的编码链中具有TTG起始密码子，并且，与编码所述可选择标记蛋白质的原始开放阅读框序列相比，所述编码可选择标记蛋白质的开放阅读框序列已经被突变，以替换其至少一半的CpG二核苷酸，其中所述DNA分子包含选自如下一组的序列：SEQ.ID.NO.3；SEQ.ID.NO.9，前提是所述起始密码子是TTG；和SEQ.ID.NO.9，前提是与原始序列所编码的多肽相比，其包含突变以编码下列多肽变体中的任何一种：(i)第201位的缬氨酸置换成甘氨酸，或(ii)第185位的谷氨酸置换成天冬氨酸，或(iii)突变(i)和(ii)的组合，前提是所述起始密码子是TTG。