一种高通量农杆菌介导的玉米基因原位转化方法

摘要

本发明公开了一种高通量农杆菌介导的玉米基因原位转化方法，其主要步骤包括：1、含有外源目的基因的农杆菌转化液的培养；2、转化液添加表面活性剂SilwetL-77后用电动注射仪将该转化液注入到玉米雌穗最内层苞叶的空隙处，使其浸泡雌花序，然后进行授粉；3、将收获种子播种后，对玉米幼苗除草剂抗性筛选，对除草剂抗性植株进行PCR检测，获得转基因植株。本方法避免了组织培养过程中对外植体基因型要求严格的缺陷和植株再生的过程，缩短了玉米转基因周期，利用电动注射仪每人每天可完成6000-8000株玉米的转化，可获得大量的转化体，进行玉米转基因研究。

主权项

一种高通量农杆菌介导的玉米基因原位转化方法，其特征在于，农杆菌菌株为LBA4404或EHA105，质粒为PCAMBIA1301，筛选标记为除草剂，包括以下步骤：步骤1：对农杆菌进行增殖培养，病毒基因诱导培养后，配制农杆菌转化液；步骤2：将步骤1的农杆菌转化液注入玉米雌穗最内层苞叶的空隙处，浸泡雌花序一定时间后进行授粉；步骤3：收获种子播种后，对幼苗进行除草剂抗性筛选；步骤4：对具有除草剂抗性的植株进行PCR检测筛选。